№

Название изобретения

Номер патента

Приоритет

Соавторы

1

2

3

4

5

Изобретения медицинского назначения

Устройства

1

 Оздоровительно-лечебная душевая установка

2185250

22.02.2001

Без соавторов

2

 Контрастный душ Л.Ф. Порядкова

2257883

25.02.2004

Без соавторов

3

 Душ-гидромассажер

2317808

17.07.2006

Без соавторов

4

 Циркулярный душ

2335276

28.06.2007

Без соавторов

5

 Циркулярный душ Л.Ф. Порядкова

2308932

28.10.2005

Без соавторов

6

 Циркулярный термоконтрастный душ

2338506

28.06.2007

Без соавторов

7

 Циркулярный термоконтрастный душ Л.Ф. Порядкова

2308933

28.10.2005

Без соавторов

8

 Опоясывающий душ Л.Ф. Порядкова

2405527

05.11.2009

Без соавторов

9

 Опоясывающий термоконтрастный душ Л.Ф. Порядкова

2405528

05.11.2009

Без соавторов

10

 Сканирующий душ

2338507

28.06.2007

Без соавторов

11

 Сканирующий термоконтрастный душ

2338508

28.06.2007

Без соавторов

12

 Термоконтрастный душ-1

2328263

13.06.2006

Без соавторов

13

 Термоконтрастный душ-2

2317807

13.06.2006

Без соавторов

14

 Душевая насадка для оздоровительно-лечебного душа

2188715

22.02.2001

Без соавторов

15

 Душевая насадка для температурного массажа

2221650

17.05.2002

Без соавторов

16

 Гидромассажный жакет

2312654

17.04.2006

Без соавторов

17

 Циркулярный солярий

2420329

05.02.2010

Без соавторов

18

 Устройство для инъекций

1717148

10.08.1989

Без соавторов

19

 Устройство для фиксации полого органа при наложении анастомоза

526363

23.02.1975

Без соавторов

20

 Зонд

683756

04.04.1977

Без соавторов

21

 Проводник для катетеров и зондов

2279258

31.01.2005

Без соавторов

22

 Поильник

2055573

16.06.1992

Без соавторов

23

 Поильник

2114600

13.09.1996

Без соавторов

24

 Аэратор

2349246

16.08.2007

Без соавторов

25

 Вспениватель

2349247

16.08.2007

Без соавторов

26

 Газатор

2344743

16.08.2007

Без соавторов

27

 Кислородная палочка

2349248

16.08.2007

Без соавторов

28

 Коктейлер

2350246

16.08.2007

Без соавторов

29

 Массажер-1

2270652

26.08.2004

Без соавторов

30

 Массажер-2

2271188

26.08.2004

Без соавторов

31

 Массажер-3

2270653

26.08.2004

Без соавторов

32

 Массажер-4

2270654

26.08.2004

Без соавторов

33

 Массажер-5

2270655

26.08.2004

Без соавторов

34

 Массажер-6

2271189

26.08.2004

Без соавторов

35

 Массажер-7

2271190

26.08.2004

Без соавторов

36

 Массажер-8

2271191

26.08.2004

Без соавторов

37

 Массажер-9

2270656

26.08.2004

Без соавторов

38

 Массажер-10

2270657

26.08.2004

Без соавторов

39

 Массажер-11

2269331

26.08.2004

Без соавторов

40

 Массажер-12

2269332

26.08.2004

Без соавторов

41

 Массажер-13

2268029

26.08.2004

Без соавторов

42

 Массажер-14

2268030

26.08.2004

Без соавторов

43

 Массажер-15

2267309

26.08.2004

Без соавторов

44

 Массажер-16

2267313

26.08.2004

Без соавторов

45

 Массажер-17

2268027

26.08.2004

Без соавторов

46

 Массажер-18

2299720

10.10.2005

Без соавторов

47

 Массажер-19

2268028

26.08.2004

Без соавторов

48

 Массажер-20

2270658

26.08.2004

Без соавторов

49

 Массажер-21

2270659

26.08.2004

Без соавторов

50

 Массажер-22

2270660

26.08.2004

Без соавторов

51

 Массажер-23

2267314

26.08.2004

Без соавторов

52

 Массажер-24

2271796

26.08.2004

Без соавторов

53

 Массажер-25

2271192

26.08.2004

Без соавторов

54

 Массажер-26

2267315

26.08.2004

Без соавторов

55

 Массажер-27

2271795

26.08.2004

Без соавторов

56

 Массажер-28

2293549

28.07.2005

Без соавторов

57

 Массажер-29

2286125

10.10.2005

Без соавторов

58

 Массажер-30

2270661

26.08.2004

Без соавторов

59

 Массажный обруч

2288692

11.05.2005

Без соавторов

60

 Обруч массажный

2432934

31.05.2010

Без соавторов

Способы

61

 Способ удлинения кишки

2125406

21.06.1995

Без соавторов

62

 Способ удлинения кишечной петли

2233624

15.01.2003

Без соавторов

63

 Способ определения активности лейцинаминопептидазы

2169925

14.06.2000

Без соавторов

64

 Пищевая смесь для зондового питания “Инпитан” и способ ее получения

1192187

28.11.1983

Нестерин М.Ф., Бренц М.Я., Крашенинин П.Ф., Фурсова С.А., Воробьева В.М., Сызранцев Ю.К., Калинина Н.Н.

65

 Композиция для получения сухого детского молочного продукта

2030876

30.12.1992

Бедных Б.С., Антипова Т.А., Гаппаров М.М.Г., Никольская Г.В., Соколов А.И., Ладур Т.А., Лапидус Т.В.

Оперативно-инструментальные способы физиологических исследований

66

 Способ образования малого желудочка у животных

1802374

18.07.1990

Без соавторов

67

 Способ образования временно изолируемой кишечной петли

2274905

23.12.2004

Без соавторов

68

 Способ перекрытия просвета кишки в эксперименте

2297697

23.12.2004

Без соавторов

69

 Способ получения пищеварительного сока

992029

10.07.1979

Без соавторов

70

 Способ получения поджелудочного сока

1627183

26.09.1988

Без соавторов

71

 Способ канюлирования внепеченочных желчных путей у животных

1800474

06.12.1990

Без соавторов

72

 Способ воспроизведения механической непроходимости протоков пищеварительных  железу животных в хроническом эксперименте

2274906

23.12.2004

Без соавторов

73

 Способ моделирования внешнесекреторной недостаточности поджелудочной железы у крыс

2282250

04.04.2005

Без соавторов

74

 Способ моделирования забрюшинной гематомы

2184397

20.07.2000

Без соавторов

Устройства для физиологических исследований

75

 Устройство для содержания животных

1579484

28.12.1987

Без соавторов

76

 Клеточная батарея для проведения исследований по парентеральному и зондовому питанию лабораторных животных

1311677

19.07.1985

М.Ф. Нестерин

77

 Устройство для проведения исследований на лабораторных животных

1750461

25.06.1990

Без соавторов

78

 Стенд для электрофизиологических исследований на крысах

2245117

10.10.2003

Без соавторов

79

 Электродное устройство для электрофизиологических исследований

2102005

05.09.1996

Без соавторов

80

 Устройство для регистрации электрокардиограммы у крысы или мыши

2281024

14.02.2005

Без соавторов

81

 Устройство для проведения инфузий мелким лабораторным животным

988862

01.03.1979

Без соавторов

82

 Устройство для отбора биологических жидкостей у животных

1662489

23.03.1989

Без соавторов

83

 Устройство для получения пищеварительных соков у животных в хроническом эксперименте

2297694

23.12.2004

Без соавторов

84

 Устройство для получения поджелудочного сока у животных

1771753

20.08.1990

Без соавторов

85

 Устройство для получения желчи у крыс в хроническом эксперименте

2282419

29.03.2005

Без соавторов

86

 Канюля для полых органов пищеварительной системы

673274

29.12.1975

Без соавторов

87

 Фистульная трубка для полых органов

852694

15.12.1977

Без соавторов

88

 Фистульная трубка

2316289

07.09.2006

Без соавторов

89

 Катетер для кровеносных сосудов

1651914

09.03.1988

Без соавторов

90

 Проводник для катетеров

1688891

10.05.1989

Без соавторов

Устройства для лабораторных работ

91

 Устройство для пипетирования жидкостей

659182

11.03.1976

Без соавторов

92

 Пипетирующее устройство

2051742

03.06.1992

Без соавторов

93

 Устройство для дозируемого пипетирования жидкостей

2032468

03.06.1992

Без соавторов

94

 Устройство для дозирования жидкостей

2054323

10.07.1992

Без соавторов

95

 Устройство для пипетирования

2101084

01.03.1996

Без соавторов

96

 Устройство для работы с пипетками

2108157

30.08.1996

Без соавторов

97

 Пипетатор

2135286

27.10.1998

Без соавторов

98

 Бюретка

617067

31.01.1975

Без соавторов

99

 Вентиль

2329101

04.04.2007

Без соавторов

100

 Держатель для флаконов (Авторское свид-cтво СССР)

394096

18.11.1971

Без соавторов

101

 Рабочая трубка для перистальтического насоса

2309294

29.05.2006

Без соавторов

Изобретения спортивного назначения

102

 Баскетбольная площадка для массовой игры

2250792

04.09.2003

Без соавторов

103

 Спортивный тренажер “Агапор”

2311216

23.05.2006

Без соавторов

104

 Спортивный тренажер

2311218

23.05.2006

Без соавторов

105

 Ножной тренажер

2311217

23.05.2006

Без соавторов

106

 Крепление для лыжной обуви

2323025

15.08.2006

Без соавторов

107

 Крепление для лыжных ботинок

2325937

15.08.2006

Без соавторов

Изобретения хозяйственно-бытового назначения

108

 Аэрогриль

2416354

25.12.2009

Без соавторов

109

 Устройство для приготовления пищи

2414162

25.12.2009

Без соавторов

110

 Устройство для варки продуктов в микроволновой печи

2231278

16.04.2002

Без соавторов

111

 Яйцеварка

2252687

29.12.2003

Без соавторов

112

 Устройство для защиты продукта от электромагнитного излучения при варке в микроволновой печи

2401632

09.10.2009

Без соавторов

113

 Устройство для экранирования продукта при его варке в микроволновой печи

2401633

9.10.2009

Без соавторов

114

 Яйцеварка для микроволновой печи

2401634

9.10.2009

Без соавторов

115

 Посуда для варки продуктов в СВЧ-печи

2458617

07.02.2011

Без соавторов

116

 Кастрюля

2410009

11.01.2010

Без соавторов

117

 Набойка для обуви

2410996

15.09.2009

Без соавторов

118

 Ручная швейная игла

2312942

24.04.2006

Без соавторов

119

 Спичка

1740360

11.06.1990

Без соавторов

Полезные модели

1

 Яйцеварка для микроволновой печи

35587

12.03.2002

Без соавторов

2

 Средство для защиты продукта от электромагнитного излучения при варке в микроволновой печи

102473

09.10.2009

Без соавторов

3

 Весы

31645

14.04.2003

Без соавторов

Оригинал

Отчет по НИР "Отбор и клиническое изучение энтеросорбентов …» (1992 г.)

Плагиат

Докторская диссертация В.Н. Малашенко (2002 г.)

Договор на выполнение работы и отчет по НИР утверждал директор НИИ скорой помощи

Тему и план диссертации утверждал ученый совет Ярославской медакадемии

Исполнитель: лаборатория экспериментальной патологии НИИ скорой помощи

Не принимал участия в экспериментальных исследованиях

Научный руководитель: Т.С. Попова

Научный консультант: Т.С. Попова

Научный консультант Чумаков А.А.

1. Методы и материал исследования

(стр. 6-10).

В ходе стендовых экспериментов и в опытах на здоровых, предварительно оперированных животных изучены следующие базовые энтеросорбенты: энтеродез (низкомолекулярный поливинилпиролидон); энтеросгель (полиметилксилоксан); СКТ-6А и "Карбоктин" - активированные угли растительного происхождения; аэросил (полисорб) - синтетический неорганический полимер; метилцеллюлоза.

Гл. 2. Материал и методы исследования

(стр. 121-122).

В ходе стендовых экспериментов изучены следующие базовые энтеросорбенты: энтеродез (низкомолекулярный поливинилпиролидон); энтеросгель (полиметилксилоксан); СКТ-6А и "Карбоктин" - активированные угли растительного происхождения; аэросил (полисорб) - синтетический неорганический полимер; метилцеллюлоза.

Проведено 122 стендовых эксперимента, в которых для последующего биохимического анализа были получены 610 проб. В каждой из них учитывались изменения объема надосадочной жидкости, величина сухого остатка в них, концентрация белка, липидов, полиуглеводов, глюкозы, натрия, калия, хлора, мочевины.

Стендовые испытания проводились в ранее разработанных условиях, позволяющих унифицировать наиболее медленную фазу процесса сорбции - доставку адсорбата к поверхности сорбента. С этой целью колбы, содержащие одинаковый объем (10 мл) исследованных сред и различные дозы (0,2; 0,5 и 1,0 г) испытуемых препаратов на весь срок наблюдения помещались в шюттель-аппарат с постоянно поддерживаемой температурой.

Проведено 122 стендовых эксперимента (in vitro), в которых для последующего биохимического анализа были получены 610 проб. В каждой из них учитывались изменения объема надосадочной жидкости, осадка, величина сухого остатка в них, концентрация белка, липидов, полиуглеводов, глюкозы, натрия, калия, хлора, мочевины.

В эксперименте испытания проводились по ранее разработанным условиям, позволившим унифицировать наиболее медленную фазу процесса сорбции - доставку адсорбата к поверхности сорбента. С этой целью колбы, содержащие одинаковый объем (10 мл) исследованных сред и различные дозы (0,2; 0,5 и 1,0 г) испытуемых энтеросорбентов на весь срок наблюдения помещались в шюттель-аппарат с постоянно поддерживаемой температурой.

Пробы для последующего биохимического анализа забирались до, непосредственно после внесения сорбентов и спустя 20, 40 и 60 минут встряхивания в шюттель-аппарате.

В отобранных пробах с помощью общепринятых биохимических методик определялось содержание натрия, калия (пламенная фотометрия), хлоридов, общих липидов методом Фолча, углеводов глюкозоксидазным методом до и после кислотного гидролиза. В части опытов с помощью анализатора "Кёльтек-2" определялось соотношение нативной и гидролизованной составляющих белка.

Измерения концентрации мочевины проводились общепринятым методом после внесения ее в каждую пробу в количестве 10 мг/мл испытуемой среды. Пробы забирались в те же сроки.

Пробы для последующего биохимического анализа забирались до, непосредственно после внесения сорбентов и спустя 20, 40 и 60 минут встряхивания в шюттель-аппарате.

В отобранных пробах с помощью общепринятых биохимических методик определялось содержание натрия, калия (пламенная фотометрия), хлоридов, общих липидов методом Фолча, углеводов глюкозоксидазным методом до и после кислотного гидролиза. В части опытов с помощью анализатора "Кельтек-2" определялось соотношение нативной и гидролизованной составляющих белка.

Измерения концентрации мочевины проводились общепринятым методом после внесения ее в каждую пробу в количестве 10 мг/мл испытуемой среды. Пробы забирались в те же сроки.

2. Влияние различных доз препаратов на состав и соотношения жидкой и плотной фазы сред и содержимого тонкой кишки (стр. 11-22).

5.5. Влияние различных доз энтеросорбентов на состав и соотношение жидкой и плотной фазы сред и содержимого тонкой кишки (стр. 245-255).

Анализ 122 стендовых опытов показал, что испытанные знтеросорбенты в зависимости от класса имеют выраженные различия в способности менять и объем, и состав содержимого того или иного отдела пищеварительного тракта. Обращал на себя внимание тот факт, что соотношения надосадочной жидкости и осадка находятся в прямой зависимости от дозы препарата только непосредственно вслед за внесением его в испытуемую среду. В более поздние сроки у большинства исследованных энтеросорбентов такой закономерности нет. При этом изменения соотношения объема осадка и надосадка у разных препаратов разнонаправлены.

Так, при использовании аэросила и в 2, и в 10% концентрации объем осадка (за счет включения воды) продолжает увеличиваться, достигая максимума через 20 минут встряхивания в шюттель-аппарате. Соотношения надосадка и осадка при применении CKT-6A и энтеросгеля не меняются на протяжении всего срока наблюдения. Объем осадка при использовании карбоктина и метилцеллюлозы, начиная с 20 минут при 5% и 10% концентрациях не меняется (рис. 1). Независимо от дозы энтеродез растворяется практически полностью.

Практическая полная растворимость энтеродеза подтверждена и в опытах следующей серии опытов, в которых мы сопоставили динамику отношения сухого остатка надосадочной жидкости химуса первого часа пищеварения к сухому веществу осадка при добавлении к 10 мл химуса 0,2; 0,5 и 1,0 энтеродеза (рис. 2 а, б, в). Как видно на рисунке эта величина возрастает после добавления любых доз препарата и удерживается на протяжении всего срока наблюдения. О равномерности распределения препарата между надосадочной жидкостью и осадком свидетельствует то обстоятельство, что частное мало меняется при повышении его дозы в пять раз (сравни а и в).

Анализ 122 стендовых опытов показал, что испытанные энтеросорбенты в зависимости от класса имеют выраженные различия в способности менять и объем, и состав содержимого того или иного отдела пищеварительного тракта. Обращал на себя внимание тот факт, что соотношение надосадочной жидкости и осадка находятся в прямой зависимости от дозы препарата только непосредственно вслед за внесением его в испытуемую среду. В более поздние сроки у большинства исследованных энтеросорбентов такой закономерности нет. При этом характер изменений соотношения объема осадка и надосадка у разных препаратов разнонаправленный.

Так, при использовании аэросила и в 2, и в 10% концентрации объем осадка (за счет включения воды) продолжал увеличиваться, достигая максимума через 20 минут встряхивания в шюттель-аппарате. Соотношения надосадка и осадка при применении CKT-6A и энтеросгеля не меняются на протяжении всего срока наблюдения. Объем осадка при использовании карбоктина и метилцеллюлозы, начиная с 20 минут при 5% и 10% концентрациях не меняется (рис. 29). Независимо от дозы энтеродез растворяется практически полностью.

Практическая полная растворимость энтеродеза подтверждена и в следующей серии опытов, в которых мы сопоставили динамику отношения сухого остатка надосадочной жидкости химуса первого часа пищеварения к сухому веществу осадка при добавлении к 10 мл химуса 0,2; 0,5 и 1,0 энтеродеза (рисунок 30а, б, в). Как видно на рисунке эта величина возрастает после добавления любых доз препарата и удерживается на протяжении всего срока наблюдения. О равномерности распределения препарата между надосадочной жидкостью и осадком свидетельствует то обстоятельство, что частное мало меняется при повышении его дозы в 5 раз (сравни а и в).

Таким образом, на основании приведенных данных есть возможность высказать суждение и о месте приложения сорбционныхсвойств препарата. То обстоятельство, что соотношение сухого остатка в надосадочной жидкости растет позволяет предположить, что процесс сорбции может протекать и в жидком содержимом полости пищеварительного тракта.

Нельзя, однако, полностью исключить и всасывание препарата в кровь. В этих условиях детоксикационный эффект будет определяться теми же механизмами, что и при внутривенном введении лечебных сред, содержащих различных фракций поливинилпиролидона.

Мы не обнаружили достоверной разницы между частным от деления величины сухого вещества надосадка и осадка химуса непосредственно после добавления к нему энтеросгеля в 2% концентрации и через 20 минут встряхивания в шюттель-аппарате (рис.3). В более поздние сроки эта величина также недостоверно снижается.

Таким образом, на основании приведенных данных есть возможность высказать суждение и о месте приложения сорбционных свойств препарата. То обстоятельство, что соотношение сухого остатка в надосадочной жидкости растет позволяет предположить, что процесс сорбции может протекать и в жидком содержимом полости пищеварительного тракта.

Нельзя, однако, полностью исключить и всасывание препарата в кровь. В этих условиях детоксикационный эффект будет определяться теми же механизмами, что и при внутривенном введении лечебных сред, содержащих различных фракций поливинилпиролидона.

Мы не обнаружили достоверной разницы между частным от деления величины сухого вещества надосадка и осадка химуса непосредственно после добавления к нему энтеросгеля в 2% концентрации и через 20 минут встряхивания в шюттель-аппарате (рис. 31). В более поздние сроки эта величина также недостоверно снижается.

Достоверные изменения показателя при использовании 5% концентрации энтеросгеля обнаружены спустя 20 минут (р<0,05). Обращает на себя внимание тот факт, что к концу срока наблюдения величина сухого остатка в надосадочной жидкости практически полностью возвращается к исходным химусным величинам. Различие же при внесении 1,0 г препарата было достоверным (р<0,02) на протяжении всего срока наблюдения.

Сопоставление полученных данных дает основание считать, что применение этого сорбента в отличие от знтеродеза, особенно при увеличении дозы, переносит процесс сорбции из полости пищеварительного тракта на поверхность слизистой. Вместе с тем полученные нами данные не позволяют полностью исключить и возможность перехода части препарата в жидкую фазу содержимогопищеварительного тракта осуществления процесса сорбции непосредственно в полости.

Как видно на рисунке 4, иная картина наблюдается при внесении энтеросорбента аэросила. Во всех случаях величина сухого остатка надосадочной жидкости достоверно (р<0,02) на протяжении всего срока наблюдения снижается. При этом следует подчеркнуть, что обнаруживается прямая зависимость между дозой вводимого препарата и степенью снижения частного от деления величины сухого остатка надосадочной жидкости и осадка.

Достоверные изменения показателя при использовании 5% концентрации энтеросгеля обнаружены спустя 20 минут (р<0,05). Обращает на себя внимание тот факт, что к концу срока наблюдения величина сухого остатка в надосадочной жидкости практически полностью возвращается к исходным химусным величинам. Различие же при внесении 1,0 г препарата было достоверным (р<0,02) на протяжении всего срока наблюдения.

Сопоставление полученных данных дает основание считать, что применение этого сорбента в отличие от знтеродеза, особенно при увеличении дозы, переносит процесс сорбции из полости пищеварительного тракта на поверхность слизистой. Вместе с тем полученные нами данные не позволяют полностью исключить и возможность перехода части препарата в жидкую фазу содержимого пищеварительного тракта осуществления процесса сорбции непосредственно в полости.

Как видно на рисунке 32, иная картина наблюдается при внесении энтеросорбента аэросила Во всех случаях величина сухого остатка надосадочной жидкости достоверно (р<0,02) на протяжении всего срока наблюдения снижается. При этом следует подчеркнуть, что обнаруживается прямая зависимость между дозой вводимого препарата и степенью снижения частного от деления величины сухого остатка надосадочной жидкости и осадка.

Сопоставление результатов биохимического исследования не выявило достоверных различий в интенсивности сорбции питательных веществ, содержащихся в химусе, от дозы использованного сорбента

Однако, при сопоставлении изменений концентрации отдельных питательных веществ при введении одинаковых доз энтеросорбентов налицо общие черты и различия, зависящее от класса использованного препарата. Так, наибольшей сорбционной способностью все исследуемые препараты обладают в отношении белка. Как видно на рисунке 5 на протяжении всего срока наблюдения содержание белка в надосадочной жидкости растеттолько при использовании знтеродеза (рис. 5,1).

В отношении углеводов и липидов сорбционная активность препаратов выражена в разной степени. Однако, как видно на рисунке 5 во всех случаях к исходу 60 минут наблюдения содержание и углеводов, и липидов в надосадочной жидкости увеличивается. Исключение составляет только сорбция липидов энтеросорбентом - аэросилом. Применение этого препарата на протяжении всего срока наблюдения практически не меняет концентрации липидов в пробе.

Сопоставление результатов биохимического исследования не выявило достоверных различий в интенсивности сорбции питательных веществ, содержащихся в химусе, от дозы использованного сорбента.

Однако, при сопоставлении изменений концентрации отдельных питательных веществ при введении одинаковых доз энтеросорбентов налицо общие черты и различия, зависящее от класса использованного препарата. Так, наибольшей сорбционной способностью все исследуемые препараты обладают в отношении белка. Как видно на рисунке 33 на протяжении всего срока наблюдения содержание белка в надосадочной жидкости растет только при использовании знтеродеза (рис. 33.1).

В отношении углеводов и липидов сорбционная активность препаратов выражена в разной степени. Однако, как видно на рисунке 33 во всех случаях к исходу 60 минут наблюдения содержание и углеводов, и липидов в надосадочной жидкости увеличивается. Исключение составляет только сорбция липидов энтеросорбентом - аэросилом. Применение этого препарата на протяжении всего срока наблюдения практически не меняет концентрации липидов в пробе.

Таким образом, результаты стендовых экспериментов позволяют прежде всего утверждать, что сорбционная активность исследованных нами базовых энтеросорбентов, независимо от их дозы в отношении основных питательных веществ низка и кратковременная максимальное снижение концентрации углеводов при использовании аэросила и липидов при использовании энтеросгеля составляет 42 и 36% соответственно. Однако, уже через 20 -40 минут содержание этих компонентов не только возвращается к исходному, но и в случае применения энтеросгеля становится выше исходной величины.

Объяснить этот факт нам позволило сопоставление изменений соотношения жидкой и плотной части содержимого пищеварительного тракта при взаимодействии с различными дозами энтеросорбентов. Полученные нами данные свидетельствуют о том, то к этому сроку на 15-20% растет объем осадка, и, казалось бы, повышение концентрации может быть обусловлено уменьшением объема надосадочной жидкости. И вместе с тем, полученные нами сведения не позволяют полностью исключить и проходящую к этому сроку наблюдения десорбцию ПВ. Оправданность такого предположения подтверждена с нашей точки зрения в опытах, где изучена кинетика сорбции мочевины из солевого энтерального раствора (смотри раздел 3).

Таким образом, результаты стендовых экспериментов позволяют прежде всего утверждать, что сорбционная активность исследованных нами базовых энтеросорбентов, независимо от их дозы в отношении основных питательных веществ низка и кратковременна. Максимальное снижение концентрации углеводов при использовании аэросила и липидов при использовании энтеросгеля составляет 42 и 36% соответственно. Однако, уже через 20 - 40 минут содержание этих компонентов не только возвращается к исходному, но и в случае применения энтеросгеля становится выше исходной величины.

Объяснить этот факт нам позволило сопоставление изменений соотношения жидкой и плотной части содержимого пищеварительного тракта при взаимодействии с различными дозами энтеросорбентов. Полученные нами данные свидетельствуют о том, то к этому сроку на 15-20% растет объем осадка, и, казалось бы, повышение концентрации может быть обусловлено уменьшением объема надосадочной жидкости. И вместе с тем, полученные нами сведения не позволяют полностью исключить и проходящую к этому сроку наблюдения десорбцию питательных веществ. Оправданность такого предположения подтверждена с нашей точки зрения в опытах, где изучена кинетика сорбции мочевины из солевого энтерального раствора (смотри раздел 3).

Существенным представляется и то, что на основании данных стендовых испытаний мы имеем возможность высказаться о месте приложения действия препаратов и, следовательно, обосновать показания к их применению. Так, использование аэросила в составе перфузионных сред скорее всего не оправдано, поскольку в этих условиях на поверхности слизистой кишки, будут накапливаться сорбированные компоненты. Представляется очевидным, что эффективное их удаление требует проведения периодов "отмывания" просвета кишки в условиях лаважа.

В отношении энтеродеза и энтеросгеля столь категорических противопоказаний включения их в состав перфузионных питательных сред, по-видимому, нет.

Кроме того, полученные в стендовых экспериментах данные дают основания считать, что выбор дозы используемого энтеросорбента во многом определяется способом его введения. Если при пероральном введений препаратов их дозировка и частота приема определяются суточной допустимой дозой, то необходимость зондового введения предъявляет серьезные требования, к выбору минимального, о достаточного для осуществления детоксикационного эффекта количества препарата.

Существенным представляется и то, что на основании данных стендовых испытаний мы имеем возможность высказаться о месте приложения действия препаратов и, следовательно, обосновать показания к их применению. Так, использование аэросила в составе перфузионных сред скорее всего не оправдано, поскольку в этих условиях на поверхности слизистой кишки, будут накапливаться сорбированные компоненты. Представляется очевидным, что эффективное их удаление требует проведения периодов "отмывания" просвета кишки в условиях лаважа.

В отношении энтеродеза и энтеросгеля столь категорических противопоказаний включения их в состав перфузионных питательных сред, по-видимому, нет.

Кроме того, полученные в стендовых экспериментах данные дают основания считать, что выбор дозы используемого энтеросорбента во многом определяется способом его введения. Если при пероральном введений препаратов их дозировка и частота приема определяются суточной допустимой дозой, то необходимость зондового введения предъявляет серьезные требования, к выбору минимального, о достаточного для осуществления детоксикационного эффекта количества препарата.

Таким образом, результаты сопоставления соотношения объемов надосадка и осадка, кинетики концентрации основных питательных веществ при взаимодействии энтеральной среды с различными дозами испытанных сорбентов, полученные в стендовых экспериментах дают основания не только оценить степень гидрофильности препаратов, но и обоснованно высказаться о показаниях к использованию той или иной дозировки в условиях клинического их применения.

Как показали полученные нами данные большинство исследованных нами знтерсорбентов (энтеродез, энтеросгель, а после размельчения на шаровой мельнице и угли растительного происхождения) в дозе не выше 2 гр/100 мл вводимой через зонд среды могут быть использованы практически на всех этапах оказания специализированной медицинской помощи.

Оправданность рекомендации обусловлена как их низкой гидрофильностью, которая не меняется на протяжении 60 минут наблюдения, так и тем, что в указанных дозах препараты практически не меняют содержание основных питательных веществ и электролитов в испытуемой среде.

Более высокие концентрации допустимы только в отношении энтеродеза. Повышение дозы одномоментно вводимых других исследованных препаратов не оправдано. Как это следует из полученных данных повышение дозы может существенно в течение 40,60 минут увеличить объем осадка, что неизбежно приведет к изменениям осмотического давления и стимуляции одного из механизмов компенсации - усиленное выделение в просвет тонкой кишки воды. В этой связи есть все основания считать, что применение этих доз энтеросорбентов возможно лишь на этапах лечения, когда либо отсутствуют, либо полностью восстановлены нарушения гемодинамики и водно-солевого баланса

В полной мере последнее относится и к показаниям к применению аэросила даже в дозе 2 гр/100 мл вводимой через зонд среды. Следует, однако, подчеркнуть, что сорбционная активность этого препарата в отношении компонентов энтеральной среды максимальна.

Таким образом, результаты сопоставления соотношения объемов надосадка и осадка, кинетики концентрации основных питательных веществ при взаимодействии энтеральной среды с различными дозами испытанных сорбентов, полученные в стендовых экспериментах дают основания не только оценить степень гидрофильности препаратов, но и обоснованно высказаться о показаниях к использованию той или иной дозировки в условиях клинического их применения.

Как показали полученные нами данные большинство исследованных нами знтерсорбентов (энтеродез, энтеросгель, а после размельчения на шаровой мельнице и угли растительного происхождения) в дозе не выше 2 г/100 мл вводимой через зонд среды могут быть использованы практически на всех этапах оказания специализированной медицинской помощи.

Оправданность рекомендации обусловлена как их низкой гидрофильностью, которая не меняется на протяжении 60 минут наблюдения, так и тем, что в указанных дозах препараты практически не меняют содержание основных питательных веществ и электролитов в испытуемой среде.

Более высокие концентрации допустимы только в отношении энтеродеза. Повышение дозы одномоментно вводимых других исследованных препаратов не оправдано. Как это следует из полученных данных повышение дозы может существенно в течение 40, 60 минут увеличить объем осадка, что неизбежно приведет к изменениям осмотического давления и стимуляции одного из механизмов компенсации - усиленное выделение в просвет тонкой кишки воды. В этой связи есть все основания считать, что применение этих доз энтеросорбентов возможно лишь на этапах лечения, когда либо отсутствуют, либо полностью восстановлены нарушения гемодинамики и водно-солевого баланса.

В полной мере последнее относится и к показаниям к применению аэросила даже в дозе 2 г/100 мл вводимой через зонд среды. Следует, однако, подчеркнуть, что сорбционная активность этого препарата в отношении компонентов энтеральной среды максимальна.

3. Кинетика сорбции «маркера» - мочевины при использовании различных доз базовых энтеросорбентов (стр. 22-.27).

Результаты стендовых экспериментов по оценке эффективности извлечения мочевины, избранной нами в качестве "маркера" эндотоксикоза, приведены в приложении и на рисунках 6 и 7.

Анализ полученных данных свидетельствует о том, что сорбционная активность испытанных нами препаратов в отношении мочевины различна. В большей мере этим свойством при введении препаратов в колбу, в которой мочевина (10 мг/мл) растворена в солевом энтеральном растворе обладают угли растительного происхождения (рис.6). С помощью энтеросгеля, аэросила и метилцеллюлозы даже в максимальных дозах сорбировать из надосадочной жидкости сколько-нибудь заметные количества мочевины не удается.

Следует отметить, что увеличение дозы препаратов и возлагаемая на это надежда на повышение эффективности детоксикации в связи с увеличением сорбционной поверхности не оправдалась. Об этом свидетельствует тот факт, что динамика снижения концентрации мочевины при использовании 2 и 10% концентрации испытанных препаратов достоверно не различается (сравни данные на рисунках 6а и 7а).

Сопоставление кинетики содержания мочевины в солевом растворе, дуоденальном соке, полученном натощак, и химусе убедило нас в том, что в большей мере на сорбционную активность большинства энтеросорбентов (энтеросгель, карбоктин, метилцеллюлоза, аэросил) оказывает влияние состав и физико-химические свойства среды, из которой мочевина извлекается. Об этом свидетельствует тот факт, что из содержимого двенадцатиперстной кишки, полученного после длительной пищевой депривации, удалить сколько-нибудь заметные количества мочевины не удается. При использовании метилцеллюлозы концентрация мочевины не меняется ни в одной из испытанных нами сред.

Анализ полученных данных выявил так же общую для всех испытанных сорбентов закономерность - по мере усложнения состава среды, из которой проводится извлечение "маркера", сорбционная активность их снижается. Как видно на рисунке 6в и 7в, где приведены данные об интенсивности сорбции мочевины из химуса, лишь непосредственно вслед за внесением аэросила концентрация мочевины падает на 32% от исходного уровня. В этих условиях сорбционную активность сохраняет только карбоктин.

5.6. Кинетика сорбции мочевины при использовании различных доз базовых энтеросорбентов (стр. 255-259).

Результаты стендовых экспериментов по оценке эффективности извлечения мочевины, избранной нами в качестве "маркера" эндотоксикоза, приведены в приложении и на рисунках 34 и 35.

Анализ полученных данных свидетельствует о том, что сорбционная активность испытанных нами препаратов в отношении мочевины различна. В большей мере этим свойством при введении препаратов в колбу, в которой мочевина (10 мг/мл) растворена в солевом энтеральном растворе обладают угли растительного происхождения (рис. 34). С помощью энтеросгеля, аэросила и метилцеллюлозы даже в максимальных дозах сорбировать из надосадочной жидкости сколько-нибудь заметные количества мочевины не удается.

Следует отметить, что увеличение дозы препаратов и возлагаемая на это надежда на повышение эффективности детоксикации в связи с увеличением сорбционной поверхности не оправдалась. Об этом свидетельствует тот факт, что динамика снижения концентрации мочевины при использовании 2 и 10% концентрации испытанных препаратов достоверно не различается (сравни данные на рисунках 34а и 35а).

Сопоставление кинетики содержания мочевины в солевом растворе, дуоденальном соке, полученном натощак, и химусе убедило нас в том, что в большей мере на сорбционную активность большинства энтеросорбентов (энтеросгель, карбоктин, метилцеллюлоза, аэросил) оказывает влияние состав и физико-химические свойства среды, из которой мочевина извлекается. Об этом свидетельствует тот факт, что из содержимого двенадцатиперстной кишки, полученного после длительной пищевой депривации, удалить сколько-нибудь заметные количества мочевины не удается. При использовании метилцеллюлозы концентрация мочевины не меняется ни в одной из испытанных нами сред.

Анализ полученных данных выявил так же общую для всех испытанных сорбентов закономерность - по мере усложнения состава среды, из которой проводится извлечение "маркера", сорбционная активность их снижается. Как видно на рисунке 34в и 35в, где приведены данные об интенсивности сорбции мочевины из химуса, лишь непосредственно вслед за внесением аэросила концентрация мочевины падает на 32% от исходного уровня. В этих условиях сорбционную активность сохраняет только карбоктин.

Таким образом, полученные нами данные дают основание считать, что рассчитывать на эффективную детоксикацию, используя только один (любой из предложенных базовых энтеросорбентов), не представляется оправданным. Эффективная детоксикация возможна при проведении энтеросорбции в комплексе лечебных мероприятий, направленных не только на выведение из организма токсических веществ эндогенного генеза, но и нормализацию деятельности всех органов и систем.

Полученные нами данные дают основание также считать, что, принимая решение о включении этого мероприятия в комплекс терапевтических воздействий, следует обязательно учитывать состояние двигательной активности пищеварительного тракта. При сохранной моторике препараты могут вводиться и перорально, и через зонд. Однако, в отсутствие перистальтики или при нарушениях двигательной активности, зондовое введение любого энтеросорбента требует обязательного последующего удаления его в условиях "лаважа".

Основанием для такого рода рекомендации служит то, что в большинстве опытов к исходу уже 60 минутного наблюдения имеет место десорбция ранее сорбированных компонентов энтеральной среды. И, следовательно, дальнейшее пребывание их в просвете тонкой кишки не имеет смысла.

Следует специально подчеркнуть, что в реальных условиях энтерального введения в очень малой степени реализуется основной принцип, который исповедуется разработчиками - прямая зависимость интенсивности сорбции от величины сорбирующей поверхности. Как это следует из проведенных сопоставлений эффект практически неразличим при применении 2% концентрации препаратов и при увеличении дозы в два - пять раз.

Таким образом, полученные нами данные дают основание считать, что рассчитывать на эффективную детоксикацию, используя только один (любой из предложенных базовых энтеросорбентов), не представляется оправданным. Эффективная детоксикация возможна при проведении энтеросорбции в комплексе лечебных мероприятий, направленных не только на выведение из организма токсических веществ эндогенного генеза, но и нормализацию деятельности всех органов и систем.

Полученные нами данные дают основание также считать, что, принимая решение о включении этого мероприятия в комплекс терапевтических воздействий, следует обязательно учитывать состояние двигательной активности пищеварительного тракта. При сохранной моторике препараты могут вводиться и перорально, и через зонд. Однако, в отсутствие перистальтики или при нарушениях двигательной активности, зондовое введение любого энтеросорбента требует обязательного последующего удаления его в условиях "лаважа".

Основанием для такого рода рекомендации служит то, что в большинстве опытов к исходу уже 60 минутного наблюдения имеет место десорбция ранее сорбированных компонентов энтеральной среды. И, следовательно, дальнейшее пребывание их в просвете тонкой кишки не имеет смысла.

Следует специально подчеркнуть, что в реальных условиях энтерального введения в очень малой степени реализуется основной принцип, который исповедуется разработчиками - прямая зависимость интенсивности сорбции от величины сорбирующей поверхности. Как это следует из проведенных сопоставлений эффект практически неразличим при применении 2% концентрации препаратов и при увеличении дозы в два - пять раз.

Оригинал

НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского. Отчет по теме НИР №057 (1999 г.), стр.8-38; 232.

Плагиат

Докторская диссертация В.Н. Малашенко (2002 г.), стр. 111-121; 225-244.

Тему, план работы и отчет по НИР утверждал директор НИИ скорой помощи

Тему и план диссертации утверждал ученый совет Ярославской медакадемии

Экспериментальные исследования по теме НИР №057 выполняли сотрудники НИИ скорой помощи

Малашенко В.Н. не участвовал в экспериментальных исследованиях по теме НИР №057

Руководитель работы: Попова Т.С.

Научный консультант: Попова Т.С.

Научный консультант: Чумаков А.А.

4. Объект исследования

Объектом исследования служили 62 крысы-самца линии “Вистар” с массой тела 300-350г, которым после предварительной оперативной подготовки производилась трехсуточная обтурация общего желчного протока с последующей декомпрессией желчеотводящих протоков. В период декомпрессии в течение трех суток животным опытной группы проводили энтеральное питание смесью “Нутризон”, обогащенный глутамином. Животным контрольной группы на фоне декомпрессии проводилось энтеральное питание питательной смесью “Нутризон”, обогащенный аминокислотной смесью “Аминоплазмаль-10%”.

2.1.1. Объект исследования

Объектом исследования служили 62 крысы-самца линии “Вистар” с массой тела 300-350г, которым после предварительной оперативной подготовки производилась трехсуточная обтурация общего желчного протока с последующей декомпрессией желчеотводящих протоков. В период декомпрессии в течение трех суток животным опытной группы проводили энтеральное питание смесью “Нутризон”, обогащенный глутамином. Животным контрольной группы на фоне декомпрессии проводилось энтеральное питание питательной смесью “Нутризон”, обогащенный аминокислотной смесью “Аминоплазмаль-10%”.

5. Методы исследования

Операционная подготовка

Исследования выполнялись на половозрелых крысах-самцах линии Вистар с исходной массой тела 300 - 350 г, которые содержались на полноценном рационе из натуральных продуктов. Предварительная оперативная подготовка у 54 крыс включала: установку катетера в общем желчном протоке, вживление зонда в двенадцатиперстную кишку, вживление зонда в желудок, у 8 крыс дополнительно проводилось вживление платиновых игольчатых электродов в стенку тощей кишки в 5 см дистальнее связки Трейца. Операции выполняли под общим гексеналовым наркозом, для чего использовали 5% раствор гексенала, который вводили крысам внутрибрюшинно из расчета 0,3 мл на 100 г массы тела.

Катетер для желчного протока, кишечный и желудочный зонды были сделаны из полиэтиленовой трубки с наружным диаметром 1 мм. Конструкция желудочного и кишечного зонда представлена на рис. 1.

Электродное устройство для электрофизиологических исследований состоит из корпуса и смонтированных в нем двух игольчатых электродов, к которым припаяны электроизолированные провода с выходом последних за пределы корпуса (рис.2). Фиксация электродного устройства на кишке осуществляется с помощью запорного элемента в форме пластинки, плотно надеваемой на свободные концы игольчатых электродов. При таком способе фиксации устройства представлялось возможным обойтись без наложения фиксирующих лигатур и тем самым избежать нежелательного дополнительного травмирования кишки. Электроизолированные провода во время операции выводились из организма наружу и на время регистрации электрической активности тонкого кишечника соединялись с регистрирующей аппаратурой.

После фиксации в соответствующих органах желчный катетер, кишечный и желудочный зонды, а также провода от электродов проводили через мягкие ткани брюшной стенки и тазовой области и затем с помощью специального инструмента протаскивали под кожей хвоста и выводили наружу в 5-6 см от его кончика. Наружные концы желчного катетера и кишечного зонда соединяли с помощью трубчатой муфточки, что предотвращало потерю желчи и обеспечивало ее поступление непосредственно в двенадцатиперстную кишку (рис.3).

После операций крысы содержались в металлических (из нержавеющей стали) индивидуальных клетках оригинальной конструкции на специальной привязи, позволявшей животным передвигаться в пределах клетки (рис. 4). Клетки открыты сверху и расположены в ряд на близком расстоянии друг от друга, что позволяло крысам в смежных клетках общаться друг с другом (рис. 5). Конструктивные особенности клеток и способ содержания в них крыс во время эксперимента обеспечивали проведение необходимых манипуляций и процедур без причинения животным боли и иных нежелательных побочных воздействий, которые могли бы отрицательно повлиять на результаты исследования.

Для энтерального зондового питания крыс и введения глутамина использовали специальную установку - трофостат (рис. 6).

В помещении, в котором содержались животные, поддерживалась температура воздуха на уровне 22-24°С и обеспечивался суточный цикл освещенности с чередованием 12-часовых периодов света и темноты.

2.2. Методы исследования

2.2.1. Операционная подготовка

Исследования выполнялись на половозрелых крысах-самцах линии Вистар с исходной массой тела 300 - 350 г, которые содержались на полноценном рационе из натуральных продуктов. Предварительная оперативная подготовка у 54 крыс включала: установку катетера в общем желчном протоке, вживление зонда в двенадцатиперстную кишку, вживление зонда в желудок, у 8 крыс дополнительно проводилось вживление платиновых игольчатых электродов в стенку тощей кишки в 5 см дистальнее связки Трейца. Операции выполняли под общим гексеналовым наркозом, для чего использовали 5% раствор гексенала, который вводили крысам внутрибрюшинно из расчета 0,3 мл на 100 г массы тела.

Катетер для желчного протока, кишечный и желудочный зонды были сделаны из полиэтиленовой трубки с наружным диаметром 1 мм. Конструкция желудочного и кишечного зонда представлена на рис. 1.

Электродное устройство для электрофизиологических исследований состоит из корпуса и смонтированных в нем двух игольчатых электродов, к которым припаяны электроизолированные провода с выходом последних за пределы корпуса (рис.2). Фиксация электродного устройства на кишке осуществляется с помощью запорного элемента в форме пластинки, плотно надеваемой на свободные концы игольчатых электродов. При таком способе фиксации устройства представлялось возможным обойтись без наложения фиксирующих лигатур и тем самым избежать нежелательного дополнительного травмирования кишки. Электроизолированные провода во время операции выводились из организма наружу и на время регистрации электрической активности тонкого кишечника соединялись с регистрирующей аппаратурой.

После фиксации в соответствующих органах желчный катетер, кишечный и желудочный зонды, а также провода от электродов проводили через мягкие ткани брюшной стенки и тазовой области и затем с помощью специального инструмента протаскивали под кожей хвоста и выводили наружу в 5-6 см от его кончика. Наружные концы желчного катетера и кишечного зонда соединяли с помощью трубчатой муфточки, что предотвращало потерю желчи и обеспечивало ее поступление непосредственно в двенадцатиперстную кишку (рис.3).

После операций крысы содержались в металлических (из нержавеющей стали) индивидуальных клетках оригинальной конструкции на специальной привязи, позволявшей животным передвигаться в пределах клетки (рис. 4). Клетки открыты сверху и расположены в ряд на близком расстоянии друг от друга, что позволяло крысам в смежных клетках общаться друг с другом (рис. 5). Конструктивные особенности клеток и способ содержания в них крыс во время эксперимента обеспечивали проведение необходимых манипуляций и процедур без причинения животным боли и иных нежелательных побочных воздействий, которые могли бы отрицательно повлиять на результаты исследования.

Для энтерального зондового питания крыс и введения глутамина использовали специальную установку - трофостат (рис. 6).

В помещении, в котором содержались животные, поддерживалась температура воздуха на уровне 22-24°С и обеспечивался суточный цикл освещенности с чередованием 12-часовых периодов света и темноты.

Условия проведения опытов

В продолжение всего эксперимента животные содержались на зондовом внутрижелудочном питании - непрерывно и круглосуточно крысам внутрижелудочно вводили питательную смесь Нутризон (Голландия). Опыты начинали проводить через 7-10 дней после вышеуказанных операций. За 18 часов до эксперимента из клеток убирали корм, но сохранялся свободный доступ крыс к воде. С целью воспроизведения обтурационного холестаза у необездвиженных и ненаркотизированных животных, разъединяли кишечный зонд и желчный катетер, а затем последний на 3-е сутки закрывали пробкой. По прошествии этого срока всем крысам опытной и контрольной групп производили декомпрессию желчевыводящих путей, для чего пробку из желчного катетера удаляли и с помощью трубчатой муфточки вновь восстанавливали ток желчи в двенадцатиперстную кишку. В течение последующих трех суток крысам опытной группы (27 крыс) в энтерально вводимую смесь Нутризон добавляли глутамин, содержание которого в питательной смеси равнялось 2% (1,3 г на крысу в сутки). Крысам контрольной группы (27 крыс) в энтерально вводимую смесь Нутризон добавляли аминокислотную смесь (Аминоплазмаль - 10%), не содержащую глутамин из расчета 1,3 г аминокислот на крысу в сутки. На всех этапах эксперимента производили взвешивание крыс.

По прошествии трех суток периода декомпресссии желчевыводящих путей и энтерального зондового питания крыс забивали декапитацией и у них забирали для последующего исследования кровь, печень, участки кишечника.

2.2.2. Условия проведения опытов

В продолжение всего эксперимента животные содержались на зондовом внутрижелудочном питании - непрерывно и круглосуточно крысам внутрижелудочно вводили питательную смесь Нутризон (Голландия). Опыты начинали проводить через 7-10 дней после вышеуказанных операций. За 18 часов до эксперимента из клеток убирали корм, но сохранялся свободный доступ крыс к воде. С целью воспроизведения обтурационного холестаза у необездвиженных и ненаркотизированных животных, разъединяли кишечный зонд и желчный катетер, а затем последний на 3-е сутки закрывали пробкой. По прошествии этого срока всем крысам опытной и контрольной групп производили декомпрессию желчевыводящих путей, для чего пробку из желчного катетера удаляли и с помощью трубчатой муфточки вновь восстанавливали ток желчи в двенадцатиперстную кишку. В течение последующих трех суток крысам опытной группы (27 крыс) в энтерально вводимую смесь Нутризон добавляли глутамин, содержание которого в питательной смеси равнялось 2% (1,3 г на крысу в сутки). Крысам контрольной группы (27 крыс) в энтерально вводимую смесь Нутризон добавляли аминокислотную смесь (Аминоплазмаль - 10%), не содержащую глутамин из расчета 1,3 г аминокислот на крысу в сутки. На всех этапах эксперимента производили взвешивание крыс.

По прошествии трех суток периода декомпресссии желчевыводящих путей и энтерального зондового питания крыс забивали декапитацией и у них забирали для последующего исследования кровь, печень, участки кишечника.

Биохимические исследования

Биохимические исследования проводились с использованием стандартных наборов реактивов промышленного производства. В плазме крови определяли активность g-глутамилтранспептидазы (g-ГТП), аспартатаминотрансферазы (АСТ), аланиламинотрансферазы (АЛТ), лейцинаминопептидазы (ЛАП) и a-амилазы. В слизистой оболочке разных отделов тонкого кишечника определяли активность ЛАП и амилазы. В печени определяли активность ЛАП. В желчи определяли содержание холевой кислоты и билирубина, а также активность ЛАП. В поджелудочной железе определяли активность a-амилазы. Все исследования выполнялись микрометодом.

Результаты исследований активности кишечных ферментов представлялись в виде средних арифметических (М) и величины среднеквадратичной ошибки (+m). Статистическая обработка данных проводилась с помощью рангового критерия Манна-Уитни и считалась достоверной при Р равном или меньше 0,05.

2.2.3. Биохимические исследования

Биохимические исследования проводились с использованием стандартных наборов реактивов промышленного производства. В плазме крови определяли активность g-глутамилтранспептидазы (g-ГТП), аспартатаминотрансферазы (АСТ), аланиламинотрансферазы (АЛТ), лейцинаминопептидазы (ЛАП) и a-амилазы. В слизистой оболочке разных отделов тонкого кишечника определяли активность ЛАП и амилазы. В печени определяли активность ЛАП. В желчи определяли содержание холевой кислоты и билирубина, а также активность ЛАП. В поджелудочной железе определяли активность a-амилазы. Все исследования выполнялись микрометодом.

Результаты исследований активности кишечных ферментов представлялись в виде средних арифметических (М) и величины среднеквадратичной ошибки (+m). Статистическая обработка данных проводилась с помощью рангового критерия Манна-Уитни и считалась достоверной при Р равном или меньше 0,05.

Регистрация и анализ электрической активности кишечника

Для записи электрической активности электроды подсоединялись к усилителю с чувствительностью 0,1 мВ. Записи производились в широкой полосе частот 0.017-200 Гц. Выходной сигнал поступал в компьютер IBM PC AT.

Сначала осуществлялся визуальный анализ электромиограмм - подсчитывались временные параметры электрической активности, которые позволяли характеризовать продолжительность мигрирующего миоэлектрического комплекса (ММК) и длительность фазы III. Компьютерная обработка регистрируемых сигналов электрической активности проводилась с помощью комплекса программ, разработанных в лаборатории математического моделирования НИИ СП им. Н.В. Склифосовского. Данный комплекс программ включал в себя спектральный анализ и алгоритм нелинейной фильтрации сигналов. Спектральный анализ на основе алгоритмов преобразования Фурье использовался для оценки медленных волн. Подсчитывались параметры, характеризующие медленные волны: наиболее характерная частота для тощей кишки (в Гц); энергия спектра на этой частоте (в мВ). Алгоритм нелинейной фильтрации использовался для оценки потенциалов действия. Производился подсчет площади преобразованной электромиограммы, что позволяло оценить среднюю интенсивность генерации потенциалов действия.

2.2.4. Регистрация и анализ электрической активности кишечника

Для записи электрической активности электроды подсоединялись к усилителю с чувствительностью 0,1 мВ. Записи производились в широкой полосе частот 0.017-200 Гц. Выходной сигнал поступал в компьютер IBM PC AT.

Сначала осуществлялся визуальный анализ электромиограмм - подсчитывались временные параметры электрической активности, которые позволяли характеризовать продолжительность мигрирующего миоэлектрического комплекса (ММК) и длительность фазы III. Компьютерная обработка регистрируемых сигналов электрической активности проводилась с помощью комплекса программ, разработанных в лаборатории математического моделирования НИИ СП им. Н.В. Склифосовского. Данный комплекс программ включал в себя спектральный анализ и алгоритм нелинейной фильтрации сигналов. Спектральный анализ на основе алгоритмов преобразования Фурье использовался для оценки медленных волн. Подсчитывались параметры, характеризующие медленные волны: наиболее характерная частота для тощей кишки (в Гц); энергия спектра на этой частоте (в мВ). Алгоритм нелинейной фильтрации использовался для оценки потенциалов действия. Производился подсчет площади преобразованной электромиограммы, что позволяло оценить среднюю интенсивность генерации потенциалов действия.

6. Полученные результаты

Влияние глутамина на печеночную недостаточность

5.1. Влияние механической желтухи, декомпрессии желчных путей и энтеральной терапии с глутамином на печеночную недостаточность

На первом этапе выполнения исследований по оценке эффективности включения глутамина в состав энтерально вводимых питательных смесей на устранение проявлений печеночной недостаточности при экспериментальном воспроизведении холестаза была проведена оценка степени поражения печени при полной 3-х суточной обтурации желчного протока.

Было установлено, что нарушение оттока желчи (внепеченочный холестаз) характеризовался развитием клинической картины механической желтухи практически у всех подопытных животных. У большинства из них желтуха проявлялась желтой окраской кожных покровов, слизистых оболочек, мочи. Основными показателями проявления холестаза служил высокий уровень билирубина (303±30,7), превосходящий исходное значение до обтурации почти в 3 раза (табл. 1).

На первом этапе выполнения исследований по оценке эффективности включения глутамина в состав энтерально вводимых питательных смесей на устранение проявлений печеночной недостаточности при экспериментальном воспроизведении холестаза была проведена оценка степени поражения печени при полной 3-х суточной обтурации желчного протока.

Было установлено, что нарушение оттока желчи (внепеченочный холестаз) характеризовался развитием клинической картины механической желтухи практически у всех подопытных животных. У большинства из них желтуха проявлялась желтой окраской кожных покровов, слизистых оболочек, мочи. Основными показателями проявления холестаза служил высокий уровень билирубина (303±30,7), превосходящий исходное значение до обтурации почти в 3 раза (табл. 16).

Известно, что желчные кислоты (или их соли) являются основным органическим компонентом желчи. Желчные кислоты поступают в желчь двумя путями - первичные желчные кислоты (холевая и хенодезоксихолевая), образуются из холестерина в печени; вторичные желчные кислоты (дезоксихолевая, литохолевая и урсодезоксихолевая) образуются под действием кишечных бактерий из первичных желчных кислот. В условиях наших экспериментов определялось содержание холевой кислоты, чрезвычайно важного субстрата для стабилизации физико-химического состояния желчи, а также переваривания и всасывания жиров. Было установлено (табл. 1), что через 3-е суток обтурации желчного протока концентрация холевой кислоты снижается почти в 3 раза, достигая 144±8,85 мкМ/л.

Важное значение в оценке степени проявления печеночной недостаточности уделяется определению активности АСТ, АЛТ. Известно, что повышение уровня АСТ и АЛГ в крови отражает степень острого повреждения гепатоцитов при токсическом лекарственном, вирусном и ишемическом гепатите. В наших наблюдениях (табл. 2) через 3-е суток обтурации увеличение содержания обнаружено лишь в отношении АСТ, при этом увеличивается соотношение АСТ/АЛТ. Такой характер изменения соотношения ферментов более часто обнаруживается при холестатическом синдроме, чем при гепатоцеллюлярных поражениях. Важными маркерами холестаза являются содержание в плазме крови gГТП и сывороточной лейцинаминопептидазы (ЛАП). Увеличение содержания gГТП и ЛАП свидетельствует о гепатобилиарном поражении и совпадает с повышением активности щелочной фосфатазы.

Известно, что желчные кислоты (или их соли) являются основным органическим компонентом желчи. Желчные кислоты поступают в желчь двумя путями - первичные желчные кислоты (холевая и хенодезоксихолевая), образуются из холестерина в печени; вторичные желчные кислоты (дезоксихолевая, литохолевая и урсодезоксихолевая) образуются под действием кишечных бактерий из первичных желчных кислот. В условиях наших экспериментов определялось содержание холевой кислоты, чрезвычайно важного субстрата для стабилизации физико-химического состояния желчи, а также переваривания и всасывания жиров. Было установлено (табл. 1), что через 3-е суток обтурации желчного протока концентрация холевой кислоты снижается почти в 3 раза, достигая 144±8,85 мкМ/л. (табл. 16).

Важное значение в оценке степени проявления печеночной недостаточности уделяется определению активности АСТ, АЛТ. Известно, что повышение уровня АСТ и АЛГ в крови отражает степень острого повреждения гепатоцитов при токсическом лекарственном, вирусном и ишемическом гепатите. В наших наблюдениях через 3-е суток обтурации увеличение содержания обнаружено лишь в отношении АСТ, при этом увеличивается соотношение АСТ/АЛТ (табл. 17). Такой характер изменения соотношения ферментов более часто обнаруживается при холестатическом синдроме, чем при гепатоцеллюлярных поражениях. Важными маркерами холестаза являются содержание в плазме крови gГТП и сывороточной лейцинаминопептидазы (ЛАП). Увеличение содержания gГТП и ЛАП свидетельствует о гепатобилиарном поражении и совпадает с повышением активности щелочной фосфатазы.

В целом анализ изменения исследуемых метаболических параметров и маркеров печеночной недостаточности в крови выявил наличие угнетения функциональной способности печени, обусловленной обтурацией общего желчного протока.

После 3-х суточной обтурации в течение 3-х суток проводилась декомпрессия желчных протоков посредством соединения желчного катетера с зондом, расположенным в 12-перстной кишке. Одновременно осуществлялось энтеральное питание смесью “Нутризон”, обогащенной глутамином в основной группе и с добавлением раствора аминокислот, не содержащего глутамина, в контрольной. Сочетанная терапия обнаруживала однонаправленное изменение изучаемых препаратов.

Положительное влияние проводимой терапии проявлялось в обеих группах достоверным снижением содержания билирубина и повышением содержания холевой кислоты в желчи (табл.1), что служило бесспорным доказательством разрешения холестаза.

В отношении активности таких ферментов как маркеры повреждения гепатоцитов (АСТ, АЛТ, АСТ/АЛТ) и маркеров холестаза (gГТП и ЛАП), хотя и была обнаружена общая тенденция к нормализации их содержания в плазме крови, сколь-нибудь значимых достоверных отличий влияния глутамина на эти процессы не обнаружено.

В целом анализ изменения исследуемых метаболических параметров и маркеров печеночной недостаточности в крови выявил наличие угнетения функциональной способности печени, обусловленной обтурацией общего желчного протока.

После 3-х суточной обтурации в течение 3-х суток проводилась декомпрессия желчных протоков посредством соединения желчного катетера с зондом, расположенным в 12-перстной кишке. Одновременно осуществлялось энтеральное питание смесью “Нутризон”, обогащенной глутамином в основной группе и с добавлением раствора аминокислот, не содержащего глутамина, в контрольной. Сочетанная терапия обнаруживала однонаправленное изменение изучаемых препаратов.

Положительное влияние проводимой терапии проявлялось в обеих группах достоверным снижением содержания билирубина и повышением содержания холевой кислоты в желчи (табл.1), что служило бесспорным доказательством разрешения холестаза.

В отношении активности таких ферментов как маркеры повреждения гепатоцитов (АСТ, АЛТ, АСТ/АЛТ) и маркеров холестаза (gГТП и ЛАП), хотя и была обнаружена общая тенденция к нормализации их содержания в плазме крови, сколь-нибудь значимых достоверных отличий влияния глутамина на эти процессы не обнаружено.

5.2. Влияние механической желтухи, декомпрессии желчных путей и энтеральной терапии с глутамином на ферментативную активность тонкой кишки

Исходное исследование активности адсорбированной a-амилазы в различных отделах тонкой кишки выявило четко выраженный проксимо-дистальный градиент со снижением концентрационных показателей от  двенадцатиперстной кишки к подвздошной соответственно с 118±21 до 7,19±1,83 Е/г (табл. 3).

Для исходных концентраций собственного кишечного фермента ЛАП характерна другая закономерность, наличие дистально-проксимального градиента со снижением концентрации  с 2,09±0,40 до 0,804±0,075 Е/г от подвздошной к двенадцатиперстной кишке.

На высоте обтурации на 3-и сутки активность a-амилазы существенно снижалась во всех исследуемых отделах более чем в 2 раза (р<0,01). 

Выполненная в течение 3-х последующих суток декомпрессия желчных путей в сочетании с энтеральным питанием позволила выявить выраженное, более, чем в 2 раза повышение содержания a-амилазы в 12-перстной кишке при добавке к смеси “Нутризон” глутамина, в то время как в контрольной серии крыс эти изменения в отношении 12-перстной кишки практически не были существенными. Следует заметить, что содержание a-амилазы в тонкой и подвздошной кишке было резко сниженным и не изменялось в результате декомпрессии и энтерального питания.

При оценке влияния глутамина на кишечный фермент ЛАП следует констатировать отсутствие выраженных изменений как в результате 3-х суточной обтурации общего желчного протока, так и после декомпресии и энтерального питания. Достоверное снижение концентрации ЛАП после введения в составе энтерального питания глутамина было отмечено лишь в подвздошной кишке.

В целом влияние глутамина на активность ферментов в слизистой тонкого кишечника проявлялось неоднозначно, хотя преобладал положительный эффект.

5.2. Влияние механической желтухи, декомпрессии желчных путей и энтеральной терапии с глутамином на ферментативную активность тонкой кишки

Исходное исследование активности адсорбированной a-амилазы в различных отделах тонкой кишки выявило четко выраженный проксимо-дистальный градиент со снижением концентрационных показателей от  двенадцатиперстной кишки к подвздошной соответственно с 118±21 до 7,19±1,83 Е/г (табл. 18).

Для исходных концентраций собственного кишечного фермента ЛАП характерна другая закономерность, наличие дистально-проксимального градиента со снижением концентрации  с 2,09±0,40 до 0,804±0,075 Е/г от подвздошной к двенадцатиперстной кишке.

На высоте обтурации на 3-и сутки активность a-амилазы существенно снижалась во всех исследуемых отделах более чем в 2 раза (р<0,01). 

Выполненная в течение 3-х последующих суток декомпрессия желчных путей в сочетании с энтеральным питанием позволила выявить выраженное, более, чем в 2 раза повышение содержания a-амилазы в 12-перстной кишке при добавке к смеси “Нутризон” глутамина, в то время как в контрольной серии крыс эти изменения в отношении 12-перстной кишки практически не были существенными. Следует заметить, что содержание a-амилазы в тонкой и подвздошной кишке было резко сниженным и не изменялось в результате декомпрессии и энтерального питания.

При оценке влияния глутамина на кишечный фермент ЛАП следует констатировать отсутствие выраженных изменений как в результате 3-х суточной обтурации общего желчного протока, так и после декомпресии и энтерального питания. Достоверное снижение концентрации ЛАП после введения в составе энтерального питания глутамина было отмечено лишь в подвздошной кишке.

В целом влияние глутамина на активность ферментов в слизистой тонкого кишечника проявлялось неоднозначно, хотя преобладал положительный эффект.

Электрофизиологические исследования

Электрическая активность тонкой кишки здоровых крыс

У 8 здоровых крыс производилась запись электрической активности тонкой кишки при 18-ти часовой пищевой депривации. Длительность записей составляла 1 час.

Исследование электрической активности тонкой кишки в норме показало, что интенсивность генерации потенциалов действия составляла 3,42±0,94 у.е. (табл. 4). У всех крыс в голодном состоянии регистрировался регулярный мигрирующий миоэлектрический комплекс (ММК), состоящий из трех фаз - фазы I - покоя, фазы II - нерегулярной активности и фазы III - регулярной (ритмической) активности (рис. 7).

Период ММК составлял от 585 до 625 сек. Продолжительность фазы III - около 210 сек. Процент времени активности - 40%.

5.4. Электрофизиологические исследования

5.4.1. Электрическая активность тонкой кишки здоровых крыс

У 8 здоровых крыс производилась запись электрической активности тонкой кишки при 18-ти часовой пищевой депривации. Длительность записей составляла 1 час.

Исследование электрической активности тонкой кишки в норме показало, что интенсивность генерации потенциалов действия составляла 3,42±0,94 у.е. (табл. 20). У всех крыс в голодном состоянии регистрировался регулярный мигрирующий миоэлектрический комплекс (ММК), состоящий из трех фаз - фазы I - покоя, фазы II - нерегулярной активности и фазы III - регулярной (ритмической) активности (рис. 25).

Период ММК составлял от 585 до 625 сек. Продолжительность фазы III - около 210 сек. Процент времени активности - 40%.

Электрическая активность тонкой кишки крыс в динамике развития обтурационного холестаза

5.4.2. Влияние механической желтухи на электрическую активность тонкой кишки крыс в динамике развития обтурационного холестаза

У 8 обследованных крыс с вживленными электродами моделировали обтурационный холестаз путем разъединения кишечного и желчного катетеров и закупорки последнего. Записи электрической активности проводились у всех крыс в первые, вторые, третьи сутки экспериментального холестаза (рис. 7). Длительность записей составляла - 1 час.

Компьютерная обработка регистрируемых сигналов электрической активности показала, что в первые сутки развития обтурационного холестаза интенсивность генерации потенциалов действия была несколько снижена и составляла 3,01±0,56 у.е. (табл. 5). У всех крыс регистрировался регулярный ММК.

Период ММК достоверно превышал фоновые значения и составлял 750+70 сек. Продолжительность фазы III – 225+20 сек. Процент времени активности был повышен (63%) за счет увеличения нерегулярной активности. Во вторые сутки интенсивность генерации потенциалов действия прогрессивно снижалась, однако достоверно не отличалась от фона. Период ММК достоверно превышал фоновые значения, длительность периодов покоя возрастала и процент времени активности был снижен (35%). Продолжительность фазы III не отличалась от нормальных значений. На третьи сутки интенсивность генерации потенциалов действия в тонкой кишки была достоверно ниже исходных значений и составляла 0,84+0,09 у.е. Период ММК достоверно превышал значения фона. Длительность периодов покоя возрастала за счет снижения нерегулярной активности. Продолжительность фазы III не отличалась от нормы.

Полученные данные свидетельствуют о том, что в динамике развития обтурационного холестаза происходило прогрессивное снижение интенсивности генерации потенциалов действия гладкой мускулатуры кишечной стенки, и, следовательно, угнетение сократительной способности кишки. К третьим суткам регистрировался правильный мигрирующий миоэлектрический комплекс (ММК), однако, его период был увеличен, т. е. ритмические фазы возникали реже. При этом продолжитель ность ритмических фаз не изменялась и соответствовала нормальным значениям.

У 8 обследованных крыс с вживленными электродами моделировали обтурационный холестаз путем разъединения кишечного и желчного катетеров и закупорки последнего. Записи электрической активности проводились у всех крыс в первые, вторые, третьи сутки экспериментального холестаза (рис. 25). Длительность записей составляла - 1 час.

Компьютерная обработка регистрируемых сигналов электрической активности показала, что в первые сутки развития обтурационного холестаза интенсивность генерации потенциалов действия была несколько снижена и составляла 3,01±0,56 у.е. (табл. 21). У всех крыс регистрировался регулярный ММК.

Период ММК достоверно превышал фоновые значения и составлял 750+70 сек. Продолжительность фазы III – 225+20 сек. Процент времени активности был повышен (63%) за счет увеличения нерегулярной активности. Во вторые сутки интенсивность генерации потенциалов действия прогрессивно снижалась, однако достоверно не отличалась от фона. Период ММК достоверно превышал фоновые значения, длительность периодов покоя возрастала и процент времени активности был снижен (35%). Продолжительность фазы III не отличалась от нормальных значений. На третьи сутки интенсивность генерации потенциалов действия в тонкой кишки была достоверно ниже исходных значений и составляла 0,84+0,09 у.е. Период ММК достоверно превышал значения фона. Длительность периодов покоя возрастала за счет снижения нерегулярной активности. Продолжительность фазы III не отличалась от нормы.

Полученные данные свидетельствуют о том, что в динамике развития обтурационного холестаза происходило прогрессивное  снижение интенсивности генерации потенциалов действия гладкой мускулатуры кишечной стенки, и, следовательно, угнетение сократительной способности кишки. К третьим суткам регистрировался правильный мигрирующий миоэлектрический комплекс (ММК), однако, его период был увеличен, т. е. ритмические фазы возникали реже. При этом продолжительность ритмических фаз не изменялась и соответствовала нормальным значениям.

Электрическая активность тонкой кишки крыс в период декомпрессии и зондового энтерального питания

По окончании третьих суток обтурационного холестаза всем крысам проводили декомпрессию (восстанавливали нормальный отток желчи в двенадцатиперстную кишку). В этих условиях все крысы были разделены на две группы – контрольная 4 - крысы, получающие энтеральное питание пищевой смесью “Нутризон” с аминокислотными добавками без глутамина, и опытная 4 - крысы, получающие энтеральное питание пищевой смесью “Нутризон” с добавлением 2% раствора глутамина. Записи электрической активности тонкой кишки проводили на первые, вторые и третьи сутки декомпрессии и энтерального питания (рис. 8 и 9). Длительность записей составляла - 1 час.

Электрическая активность тонкой кишки крыс в период декомпрессии и зондового энтерального питания

По окончании третьих суток обтурационного холестаза всем крысам проводили декомпрессию (восстанавливали нормальный отток желчи в двенадцатиперстную кишку). В этих условиях все крысы были разделены на две группы – контрольная 4 - крысы, получающие энтеральное питание пищевой смесью “Нутризон” с аминокислотными добавками без глутамина, и опытная 4 - крысы, получающие энтеральное питание пищевой смесью “Нутризон”  с добавлением 2 % раствора глутамина. Записи электрической активности тонкой кишки проводили на первые, вторые и третьи сутки декомпрессии и энтерального питания (рис. 26 и 27). Длительность записей составляла - 1 час.

Контрольная группа (энтеральное питание без глутамина)

Компьютерная обработка регистрируемых сигналов электрической активности показала, что в первые сутки декомпрессии и энтерального питания с добавлением аминокислот не содержащего глутамин интенсивность генерации потенциалов действия была близка к фоновым значениям и составляла 2,87±0,44 у.е. (Табл. 6). У всех крыс регистрировался регулярный ММК. Период ММК достоверно превышал фоновые значения и составлял 770+82 сек. Продолжительность фазы III – 205+21 сек. Наблюдалось появление внеочередных III фаз. Процент времени активности был повышен (60%) за счет увеличения нерегулярной активности. Во вторые сутки интенсивность генерации потенциалов действия снижалась и достоверно отличалась от фона, составляя 1,14+0,19 у.е. Период ММК был слабо выражен, преобладала нерегулярная активность, и процент времени активности был высоким (64%). На третьи сутки интенсивность генерации потенциалов действия возрастала, однако была достоверно ниже исходных значений и составляла 2,03+0,26 у.е.

Период ММК достоверно превышал значения фона за счет сильно выраженной нерегулярной активности. Продолжительность фазы III не отличалась от нормы.

5.4.3. Контрольная группа (энтеральное питание без глутамина)

Компьютерная обработка регистрируемых сигналов электрической активности показала, что в первые сутки декомпрессии и энтерального питания с добавлением аминокислот не содержащего глутамин интенсивность генерации потенциалов действия была близка к фоновым значениям и составляла 2,87±0,44 у.е. (Табл. 22). У всех крыс регистрировался регулярный ММК. Период ММК достоверно превышал фоновые значения и составлял 770+82 сек. Продолжительность фазы III – 205+21 сек. Наблюдалось появление внеочередных III фаз. Процент времени активности был повышен (60%) за счет увеличения нерегулярной активности. Во вторые сутки интенсивность генерации потенциалов действия снижалась и достоверно отличалась от фона, составляя 1,14+0,19 у.е. Период ММК был слабо выражен, преобладала нерегулярная активность, и процент времени активности был высоким (64%). На третьи сутки интенсивность генерации потенциалов действия возрастала, однако была достоверно ниже исходных значений и составляла 2,03+0,26 у.е.

Период ММК достоверно превышал значения фона за счет сильно выраженной нерегулярной активности. Продолжительность фазы III не отличалась от нормы.

Опытная группа (энтеральное питание с добавлением глутамина)

Впервые сутки декомпрессии и энтерального питания с добавлением глутамина интенсивность генерации потенциалов действия не отличалась от фоновых значений и составляла 2,98±0,27 у.е. (табл. 7). Период ММК и продолжительность фазы соответствовали норме. Процент времени активности был повышен (55%) за счет увеличения нерегулярной активности. Во вторые сутки интенсивность генерации потенциалов действия возрастала, однако ее  значения достоверно не отличались от фона, и составляли 3,71+0,56 у.е. Период ММК был слабо выражен, преобладала сильная нерегулярная активность, и наблюдались внеочередные III фазы. Продолжительность фазы III, тем не менее, не отличалась от фоновых значений. Процент времени активности был высоким (78%). На третьи сутки интенсивность генерации потенциалов действия не отличалась от исходных значений и составляла 3,12+0,41 у.е. Период ММК и продолжительность фазы III не отличалась от нормы.

Сразу после декомпрессии (в первые сутки) наблюдалось резкое усиление интенсивности спайковой активности у животных контрольной и опытной групп. Это закономерный процесс, так как желчь является физиологическим стимулятором моторной функции тонкой кишки. Однако, уже на вторые сутки после декомпрессии наблюдались существенные различия в ответной реакции тонкой кишки на воздействия. В опытной группе животных (с добавлением глутамина) происходило дальнейшее усиление спайковой электрической активности, в то время как в контрольной группе она снизилась. К третьим суткам в опытной группе животных электрическая спайковая активность нормализовалась. В контрольной группе животных декомпрессия (с добавлением аминокислот без глутамина) интенсивность спайковой электрической активности была достоверно ниже исходных значений к третьим суткам декомпрессии. Кроме того, период ММК в контрольной группе превышал исходные значения даже к третьим суткам, в то время как в опытной группе период ММК нормализовался к концу опыта (третьи сутки).

На рис. 10 представлены примеры обработки электромиограмм методом спектрального анализа. Оценка изменения частоты медленных волн (или базального электрического ритма - БЭР) тощей кишки позволила выявить определенные тенденции изменения электрической активности в динамике развития и разрешения обтурационного холестаза. Как видно из представленных графиков, в первые сутки экспериментального холестаза происходит резкое скачкообразное увеличение частоты БЭР. К третьим суткам холестаза частота остается повышенной и при этом снижается амплитуда спектров. Восстановление оттока желчи в двенадцатиперстную кишку приводит к постепенной нормализации (к третьим суткам) как частоты, так и амплитуды БЭР.

Опытная группа (энтеральное питание с добавлением глутамина)

Впервые сутки декомпрессии и энтерального питания с добавлением глутамина интенсивность генерации потенциалов действия не отличалась от фоновых значений и составляла 2,98±0,27 у.е. (табл. 23). Период ММК и продолжительность фазы соответствовали норме. Процент времени активности был повышен (55%) за счет увеличения нерегулярной активности. Во вторые сутки интенсивность генерации потенциалов действия возрастала, однако ее  значения достоверно не отличались от фона, и составляли 3,71+0,56 у.е. Период ММК был слабо выражен, преобладала сильная нерегулярная активность, и наблюдались внеочередные III фазы. Продолжительность фазы III, тем не менее, не отличалась от фоновых значений. Процент времени активности был высоким (78%). На третьи сутки интенсивность генерации потенциалов действия не отличалась от исходных значений и составляла 3,12+0,41 у.е. Период ММК и продолжительность фазы III не отличалась от нормы.

Сразу после декомпрессии (в первые сутки) наблюдалось резкое усиление интенсивности спайковой активности у животных контрольной и опытной групп. Это закономерный процесс, так как желчь является физиологическим стимулятором моторной функции тонкой кишки. Однако, уже на вторые сутки после декомпрессии наблюдались существенные различия в ответной реакции тонкой кишки на воздействия. В опытной группе животных (с добавлением глутамина) происходило дальнейшее усиление спайковой электрической активности, в то время как в контрольной группе она снизилась. К третьим суткам в опытной группе животных электрическая спайковая активность нормализовалась. В контрольной группе животных декомпрессия (с добавлением аминокислот без глутамина) интенсивность спайковой электрической активности была достоверно ниже исходных значений к третьим суткам декомпрессии. Кроме того, период ММК в контрольной группе превышал исходные значения даже к третьим суткам, в то время как в опытной группе период ММК нормализовался к концу опыта (третьи сутки).

На рис. 28 представлены примеры обработки электромиограмм методом спектрального анализа. Оценка изменения частоты медленных волн (или базального электрического ритма - БЭР) тощей кишки позволила выявить определенные тенденции изменения электрической активности в динамике развития и разрешения обтурационного холестаза. Как видно из представленных графиков, в первые сутки экспериментального холестаза происходит резкое скачкообразное увеличение частоты БЭР. К третьим суткам холестаза частота остается повышенной и при этом снижается амплитуда спектров. Восстановление оттока желчи в двенадцатиперстную кишку приводит к постепенной нормализации (к третьим суткам) как частоты, так и амплитуды БЭР.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что при экспериментальном холестазе происходят серьезные нарушения моторной функции тонкой кишки, проявляющиеся как в снижении ее сократительной способности, так и нарушении ее координированной деятельности.

Нарушения энтерогепатического круговорота желчи представляет собой важное патогенетическое звено при развитии ряда заболеваний. Затрудненный отток желчи из печени в кишку вследствие механического препятствия приводит к хронической нехватке желчи в кишечнике, недостаточности переваривания и всасывания нутриентов.

Функцию желчи как внутриполостного стимулятора сокращений кишечника следует признать весьма важной в самовозобновлении ритма периодической деятельности. И поскольку наиболее четкие циклы и способность стимулировать моторику присущи желчным кислотам, можно предположить, что энтеропатическая циркуляция желчных кислот играет существенную роль в образовании ММК.

Восстановление оттока желчи в двенадцатиперстную кишку оказывает нормализующее влияние на интенсивность спайковой электрической активности тонкой кишки. Добавление глутамина к питательной смеси “Нутризон” приводит к более быстрому восстановлению сократительной активности тонкой кишки.

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что при экспериментальном холестазе происходят серьезные нарушения моторной функции тонкой кишки, проявляющиеся как в снижении ее сократительной способности, так и нарушении ее координированной деятельности.

Нарушения энтерогепатического круговорота желчи представляет собой важное патогенетическое звено при развитии ряда заболеваний. Затрудненный отток желчи из печени в кишку вследствие механического препятствия приводит к хронической нехватке желчи в кишечнике, недостаточности переваривания и всасывания нутриентов.

Функцию желчи как внутриполостного стимулятора сокращений кишечника следует признать весьма важной в самовозобновлении ритма периодической деятельности. И поскольку наиболее четкие циклы и способность стимулировать моторику присущи желчным кислотам, можно предположить, что энтеропатическая циркуляция желчных кислот играет существенную роль в образовании ММК.

Восстановление оттока желчи в двенадцатиперстную кишку оказывает нормализующее влияние на интенсивность спайковой электрической активности тонкой кишки. Добавление глутамина к питательной смеси “Нутризон” приводит к более быстрому восстановлению сократительной активности тонкой кишки.

Научная новизна

Разработана модель обтурационного холестаза, которая в условиях хронического эксперимента на необездвиженных и ненаркотизированных крысах позволяет оценивать влияние различных лечебных мероприятий, в частности, эффективность декомпрессии в сочетании с энтеральным питанием в коррекции печеночно-кишечной недостаточности при обтурационном холестазе (механической желтухе).

Впервые в условиях хронического эксперимента удалось охарактеризовать динамику печеночно-кишечной недостаточности на модели обтурационного холестаза. Показано, что через 3-е суток обтурации желчного протока развивается печеночная недостаточность, проявляющаяся резким повышением концентрации билирубина и холевой кислоты в желчи, повышением содержания ферментов маркеров АСТ, АЛТ, gГТП в плазме крови параллельно с изменениями кишечных ферментов и угнетением электрической активности в тонкой кишке.

Показано, что энтеральное питание смесью, обогащенной глутамином, в сочетании с декомпрессией желчных протокой способствует более быстрому и более эффективному разрешению печеночно-кишечной недостаточности с ранней нормализацией лабораторных маркеров печеночной недостаточности и электрической активности кишечника по сравнению с контрольной группой животных, получавших энтеральное питание с добавкой аминокислот, не содержащих глутамин.

С целью коррекции печеночно-кишечной недостаточности, обусловленных обтурационным холестазом, глутамин целесообразно вводить с первых же часов после разрешения обтурации желчевыводящих путей.

Резюме

Разработана модель обтурационного холестаза, которая в условиях хронического эксперимента на необездвиженных и ненаркотизированных крысах позволяет оценивать влияние различных лечебных мероприятий, в частности, эффективность декомпрессии в сочетании с энтеральным питанием в коррекции печеночно-кишечной недостаточности при обтурационном холестазе (механической желтухе).

Впервые в условиях хронического эксперимента удалось охарактеризовать динамику печеночно-кишечной недостаточности на модели обтурационного холестаза. Показано, что через 3-е суток обтурации желчного протока развивается печеночная недостаточность, проявляющаяся резким повышением концентрации билирубина и холевой кислоты в желчи, повышением содержания ферментов маркеров АСТ, АЛТ, gГТП в плазме крови параллельно с изменениями кишечных ферментов и угнетением электрической активности в тонкой кишке.

Показано, что энтеральное питание смесью, обогащенной глутамином, в сочетании с декомпрессией желчных протокой способствует более быстрому и более эффективному разрешению печеночно-кишечной недостаточности с ранней нормализацией лабораторных маркеров печеночной недостаточности и электрической активности кишечника по сравнению с контрольной группой животных, получавших энтеральное питание с добавкой аминокислот, не содержащих глутамин.

С целью коррекции печеночно-кишечной недостаточности, обусловленных обтурационным холестазом, глутамин целесообразно вводить с первых же часов после разрешения обтурации желчевыводящих путей.

9. Эффективность

Экспериментальные исследования показали, что энтеральное введение глутамина наряду с декомпрессией желчных путей является эффективным средством для устранения печеночно-кишечной недостаточности, обусловленной обтурацией желчных протоков.

Полученные в эксперименте данные позволяют рекомендовать клиническое применение глутамина у пациентов с обтурационным холестазом. Назначение глутамина при этапном лечении холестаза, с целью устранения печеночно-кишечной недостаточности и коррекции метаболизма наряду с использованием чрезкожной чрезпеченочной микрохолецистостомии позволит позитивно изменить структуру выполняемых холецистоэктомий в пользу отсроченных и плановых операций, что, в свою очередь, позволит снизить число послеоперационных осложнений и показателей летальности.

Экспериментальные исследования показали, что энтеральное введение глутамина наряду с декомпрессией желчных путей является эффективным средством для устранения печеночно-кишечной недостаточности, обусловленной обтурацией желчных протоков.

Полученные в эксперименте данные позволяют рекомендовать клиническое применение глутамина у пациентов с обтурационным холестазом. Назначение глутамина при этапном лечении холестаза, с целью устранения печеночно-кишечной недостаточности и коррекции метаболизма наряду с использованием чрезкожной чрезпеченочной микрохолецистостомии позволит позитивно изменить структуру выполняемых холецистоэктомий в пользу отсроченных и плановых операций, что, в свою очередь, позволит снизить число послеоперационных осложнений и показателей летальности.

10. Выводы

1. Моделируемый в хронических экспериментах на крысах 3-х суточный обтурационный холестаз сопровождается повышением содержания билирубина и холевой кислоты в желчи, повышением содержания ферментных маркеров печеночной недостаточности (АСТ, АЛТ, g-ГТП) вплазме крови,… и динамически нарастающем угнетением электрической активности в тонкой кишке.

2. Энтеральное введение глутамина в составе питательной смеси на фоне декомпрессии желчных протоков и восстановлении поступления желчи в кишечник позволяет устранить проявления печеночной недостаточности и добиться быстрого и полноценного восстановления электрической активности тонкого кишечника.

3. Энтеральное введение глутамина в сочетании с декомпрессией и восстановлением поступления желчи в кишечник оказывает стимулирующее влияние на активность адсорбированных и кишечных ферментов во всех отделах тонкой кишки.

Моделируемый в хронических экспериментах на крысах 3-х суточный обтурационный холестаз сопровождается повышением содержания билирубина и холевой кислоты в желчи, повышением содержания ферментных маркеров печеночной недостаточности (АСТ, АЛТ, g-ГТП) в плазме крови,… и динамически нарастающем угнетением электрической активности в тонкой кишке.

Энтеральное введение глутамина в составе питательной смеси на фоне декомпрессии желчных протоков и восстановлении поступления желчи в кишечник позволяет устранить проявления печеночной недостаточности и добиться быстрого и полноценного восстановления электрической активности тонкого кишечника.

Энтеральное введение глутамина в сочетании с декомпрессией и восстановлением поступления желчи в кишечник оказывает стимулирующее влияние на активность адсорбированных и кишечных ферментов во всех отделах тонкой кишки.