ПРОБИОТИЧЕСКИЕ ПРОДУКТЫ ПИТАНИЯ И ЕСТЕСТВЕННАЯ ЗАЩИТНАЯ СИСТЕМА ОРГАНИЗМА

Определение пробиотиков еще окончательно не выработано, однако по своей сути пробиотики - это полезные для здоровья живые микробные компоненты пищевых продуктов. Пробиотики обладают следующими свойствами: • могут являться компонентами пищи; • являются жизнеспособными клетками, которые в больших количествах содержатся в пробиотических продуктах питания; • стабильны и выживают на протяжении всего срока годности продукта; • способны выживать в кишечнике, т.е. устойчивы в кислой среде желудка и воздействию ферментов; • оказывают благотворное влияние на организм, например, усиливают его сопротивляемость болезням. Поскольку разные штаммы обладают различными свойствами, следовательно, необходимо изучать особенности каждого штамма и/или их комбинации. Это видно на примере исследования адгезивных свойств in vitro, которое показало, что одни пробиотики ассоциируются с энтероцитами, тогда как другие не обладают такой способностью. Клиническая значимость этого свойства остается до конца не установленный. Новой и приобретающей все более важное значение областью исследований является изучение механизмов, посредством которых пробиотики влияют на естественные защитные системы.

Авторы:
Хавкин А.И.

Издание: Русский медицинский журнал
Год издания: 2009
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2009.-N 4.-С.241-245. Библ. 0 назв.

ПРОБИОТИЧЕСКИЕ ПРОДУКТЫ ПИТАНИЯ И ЕСТЕСТВЕННАЯ ЗАЩИТНАЯ СИСТЕМА ОРГАНИЗМА

Определение пробиотиков еще окончательно не выработано, однако по своей сути пробиотики - это полезные для здоровья живые микробные компоненты пищевых продуктов. Пробиотики обладают следующими свойствами: • могут являться компонентами пищи; • являются жизнеспособными клетками, которые в больших количествах содержатся в пробиотических продуктах питания; • стабильны и выживают на протяжении всего срока годности продукта; • способны выживать в кишечнике, т.е. устойчивы в кислой среде желудка и воздействию ферментов; • оказывают благотворное влияние на организм, например, усиливают его сопротивляемость болезням. Поскольку разные штаммы обладают различными свойствами, следовательно, необходимо изучать особенности каждого штамма и/или их комбинации. Это видно на примере исследования адгезивных свойств in vitro, которое показало, что одни пробиотики ассоциируются с энтероцитами, тогда как другие не обладают такой способностью. Клиническая значимость этого свойства остается до конца не установленный. Новой и приобретающей все более важное значение областью исследований является изучение механизмов, посредством которых пробиотики влияют на естественные защитные системы.

Авторы:
Хавкин А.И.

Издание: Русский медицинский журнал
Год издания: 2009
Объем: 5с.
Дополнительная информация: 2009.-N 4.-С.241-245. Библ. 0 назв.

Опубликовано в журнале:
«ДЕТСКИЕ ИНФЕКЦИИ» 2007, № 3, с. 64-69
СОВРЕМЕННЫЕ ПРИНЦИПЫ ВЫБОРА ПРОБИОТИКОВ

Е. А. КОРНИЕНКО
САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ ПЕДИАТРИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

В статье представлен механизм действия пробиотиков и возможности их применения при кишечных инфекциях, антибиотикоассоциированной диарее, Н. pylori-инфекции, для лечения и профилактики пищевой аллергии, у часто и длительно болеющих детей. Ключевые слова: пробиотики, диарея, дети
MODERN PRINCIPLES OF SELECTING SUITABLE PROBIOTICS

KORNIYENKO E.A.
STATE ST.PETERSBURG ACADEMY OF PEDIATRICS

The article describes the mechanism of the influence of probiotics on the human organism and potentialities of these drugs for successfully treating frequently and long ailing infantine patients suffering from intestinal infectious diseases, antibiotic associated diarrhea, H. pylori-infectious maladies and food allergy (curing plus prophylactic precautions). Key words: probiotics, diarrhea, infants/children

Попытки воздействовать на кишечный биоценоз и через него — на здоровье человека, имеют долгую историю. Еще И. И. Мечников в 1910 г. предлагал использовать кисломолочные продукты для омоложения и продления жизни. С 30-х годов прошлого столетия ведут отсчет препараты, содержащие лактобактерии и бифидобактерии, так называемые пробиотики. Сам термин «пробиотики», буквально означающий «за жизнь», возник позднее, как альтернатива термину «антибиотики», буквально означающему «против жизни». Наиболее современное определение пробиотиков было дано рабочей группой ВОЗ в 2002 г:

Пробиотики — это живые микроорганизмы, которые при применении в адекватных количествах вызывают улучшение здоровья организма-хозяина.

В этом определении заложены основные требования, предъявляемые к препаратам, которые претендуют на то, чтобы быть отнесенным к пробиотикам: сохранность живых микробов, их достаточное количество и доказанная эффективность. По мнению Gorbach S. L. (2000) [1], требования должны быть более строгими.

Пробиотики:

* Должны быть фено- и генотипически классифицируемыми
* Не должны обладать патогенностъю
* Должны сохраняться живыми
* Должны быть кислотоустойчивыми или заключены в кислотоустойчивую капсулу
* Способны к адгезии к кишечному эпителию
* Способны к колонизации кишечника
* Должны быть безопасными

Только доказавшие свою клиническую эффективность в плацебо-контролируемых исследованиях штаммы могут быть использованы для производства пробиотиков (табл. 1).

Таблица 1.
Виды и штаммы микроорганизмов, входящих в состав пробиотиков
Род Вид Штамм
Lactobacillus








L. acidophilus L. gasseri
L. rhamnosus L. ramnosus GG
L. plantarum L. plantarum 299 v
L. reuteri
L. fermentum L. fermentum KLD
L. lactis
L. casei L. Shirota
L. bulgaricum
Bifidobacterium B. longum B. infantis; BB536
B. bifidum
B. breve
B. adolescentis
B. animalis B. lactis Bb 12
Streptococcus S. thermophylus
Enterococcus E. faecium Enterococcus SF68
Saccharomyces S. boulardi

Указанные микроорганизмы можно классифицировать также по происхождению:

1 группа: Кисломолочные штаммы [L acidophilus, L. plantarum, L. bulgaricum, L. casei, L. fermentum, Str. thermophylus, Enterococci L-3, B. lactis)

2 группа: Донорские штаммы [Bifidobacteriae bifidum, B. longum, B. infantis, B. adolescents, L. rhamnosus GG, L. gassed, Enterococci faecium, salivarius)

3 группа: Антагонисты [В. subtilis, S. boulardii]

При выборе пробиотического препарата возникает несколько проблемных вопросов, первый из которых выживаемость. Как указывалось выше, пробиотическими свойствами обладают только живые микробы. Более того, целым рядом работ было показано, что минимально достаточной дозой, способной осуществлять значимое действие, может считаться доза не менее 107 КОЕ [2]. Как обеспечить доставку пробиотиков в кишечник в достаточной дозе?

Выживаемость бактерий зависит от технологии производства и условий хранения препарата. Например, добавление бифидобактерий в кефир не гарантирует их сохранности и способности к вегетации; жизнеспособность микрофлоры как в жидких, так и в простых сухих формах препаратов может быть утрачена ранее официального срока. Для большинства пробиотиков, особенно для жидких лекарственных форм, требуются особые условия хранения, например, температура. Следует учитывать разрушительное действие желудочного сока на незащищенную флору. Доказано, что лишь небольшое число штаммов лактобактерий (L. reuteri, L. plantarum NCIB8826, S. boulardii, L. acidophilus, L. casei Shirota) и бифидобактерий обладает кислотоустойчивостью, большинство микробов погибает в желудке. Поэтому предпочтительны пробиотики, заключенные в кислотоустойчивую капсулу. По данным Bezkorovainy A. (2001) [3], лишь 20— 40% селективных штаммов выживает в желудке. Pochart D. (1998) [4] продемонстрировал, что из 108 микр. тел лактобактерий, принятых в кислотоустойчивой капсуле, в кишечнике обнаруживается 107, после приема такого же количества в йогурте — 104 микр. тел, а после приема той же дозы в открытом виде в виде порошка микробы в кишечнике не обнаруживаются вовсе.

В тонкой кишке пробиотики подвергаются воздействию желчных кислот и панкреатических ферментов. Вследствие этого многие микробы, например, L. fermentum KLD, L. lactis MG1363 почти полностью погибают. Это может объясняться усилением проницаемости клеточной мембраны бактерий, которое возникает в ответ на воздействие желчных кислот. Выживание же большинства бактерий зависит от того, каким образом они принимаются: в защитной капсуле, в виде йогурта, с молоком или без всякой защиты. Так, согласно Kailasapathy К. [5], многие штаммы, например, лактобацилл из кисломолочных продуктов либо не достигают кишечника, либо выживают в нем только несколько дней. Эти данные ставят под сомнение эффективность незащищенных и не обладающих кислотоустойчивостью пробиотиков.

Исключение составляют дети первого года жизни, которые из-за недостаточной выработки соляной кислоты в желудке могут получать пробиотики в незащищенном виде, но лучше во время еды, поскольку буферные свойства молока повышают сохранность микрофлоры. Выбор содержащего бифидобактерий препарата должен проводиться в соответствии с доминированием тех или иных штаммов в данной возрастной группе. Исследование Favier с соавт. [6] показало, что первичная колонизация кишечника доношенных новорожденных В. longum spp. infantis и В. pseudocatenulatum обеспечивает в дальнейшем стабильность индигенной микробы, а В. breve и В. scardovii— нет. Butel с соавт. [7] в динамическом исследовании микробиоты кишечника недоношенных детей обнаружили, что стабильная популяция бифидобактерий (преимущественно В. longum, а также В. bifidum и В. lactis) устанавливается только после 33 недель гестации и не ранее 3 недель после рождения, что объясняется формированием гликолизированных рецепторов эпителия кишки. Поэтому при выборе пробиотика для лечения детей раннего возраста предпочтение следует отдавать В. longum (особенно spp. В. infantis) и В. bifidum, а детям старшего возраста и взрослым более показаны В. longum и В. adolescents [8]. У детей первого года жизни можно использовать адаптированные молочные смеси с пробиотиками.

Механизм действия пробиотиков и возможности применения. Действие пробиотиков не сводится к простому заселению кишечника, как это зачастую представляется. Их влияние более сложно и многопланово. Это: конкуренция с патогенной и условно-патогенной микрофлорой; адгезия к слизистой оболочке кишечника и взаимодействие с эпителиоцитами; иммуномодулирующий эффект.

Конкурентное действие пробиотиков осуществляется благодаря: способности синтезировать бактерицидные вещества (молочная кислота и КЦЖК, перекись водорода, сероводород); конкуренции за питательные вещества и факторы роста; снижению внутриполостной рН (молочная кислота); предотвращению адгезии и инвазии в слизистую оболочку патогенных микробов.

Применение пробиотиков при инфекционной диарее. Пробиотики оказывают защитное действие по отношению к чужеродной патогенной и условно-патогенной микрофлоре за счет нескольких механизмов. Они прямо конкурируют с ней за питательные вещества и сайты адгезии, вырабатывают метаболиты, подавляющие ее рост (короткоцепочечные жирные кислоты, молочную кислоту, перекись водорода, пироглютамат). Многие штаммы вырабатывают бактериоцины — антибиктериальные субстанции, которые также ингибируют рост других микробов. Этой способностью в высокой степени обладают энтерококки и лактобактерии. Многие пробиотики обладают прямым антитоксическим действием. Они способны нейтрализовать цито- и энтеротоксины вирусов и бактерий: энтеропатогенных и энтеротоксигенных эшерихий, клостридий, холеры. Так, в исследовании Czerucka D. [9] было показано снижение секреции натрия и воды и образования цАМф в кишечнике больных острой инфекционной диареей на фоне назначения S. boulardii. Resta-Lenert S., Barrett К. Е. [10] показали, что L. acidophilus и Sir. thermophilus не действуют на кишечную секрецию сами по себе, но снижают ее после стимуляции энтеротоксином. Этим объясняется быстрое устранение физиологических дисфункций кишечника на фоне назначения пробиотиков при инфекционной диарее. Наиболее сильное прямое антимикробное и антитоксическое действие было доказано у конкурентных пробиотиков S. boulardii и В. subtilis. Антитоксический эффект доказан у L. acidophilus (по отношению к rotavirus, Cl. difficile, Е col,), у L. rhamnosus GG (к rotavirus, Cl. difficile, Е. coli), у Ent. faecium SF-68 (к Cl. difficile; E. coli), у St. thermophilus (к Е. coli), у L. plantarum (к Е. coli). Бифидобактерии имеют профилактическое действие в отношении кишечных инфекций и некротического энтероколита новорожденных [7, 11], лечебный эффект доказан для некоторых штаммов, в частности В. longum BB536 [12].

Прямое антимикробное и антитоксическое действие пробиотиков позволяет с успехом применять их при лечении легких и среднетяжелых форм кишечных инфекций. Особенно эффективны пробиотики при вирусных диареях (рота-, адено-, калици-, астровирусы), энтеропатогенных эшерихиозах и антибиотикоассоциированной диарее [13].

Применение пробиотиков при антибиотикоассоциированной диарее. Широкое использование антибиотиков в клинической практике сопряжено с возможными осложнениями, одним из которых является антибиотикоассоциированная диарея (ААД). В большинстве случаев ААД связана с ростом Cl. difficile, обладающей резистентностью к большинству антибиотиков, у 20% ААД имеет рецидивирующее течение. Назначение ванкомицина и метронидазола, к которым Cl. difficile обычно чувствительна, не предотвращает рецидивов. Конкурентное действие пробиотиков, в частности, конкуренция с Cl. difficile за питательные вещества и сайты адгезии, антитоксическое их действие дают возможность применять пробиотики для профилактики и лечения ААД. Pochapin M. [14] была показана эффективность Lactobacillus GG (LGG) при лечении ААД в сравнении с плацебо. D'Souza A. L. опубликовал результаты мета-анализа применения пробиотиков при ААД в период с 1966 по 2002 г. [15], на основании результатов 9 открытых рандомизированных исследований был сделан вывод, что LGG, S. boulardii и Ent. faecium SF-68 эффективно редуцируют ААД, a LGG и S. boulardii, кроме того, достоверно устраняют ее рецидивы. В 22 исследованиях показан положительный эффект от назначения пробиотиков при ААД.

Учитывая эти данные, показанием для назначения пробиотиков можно считать не только ААД как таковую, но и антибиотикотерапию, особенно повторную и длительную, с целью профилактики ААД. При этом важным требованием к пробиотикам является антибиотикорезистентность. В то же время антибиотикорезистентность пробиотического штамма может противоречить требованиям лекарственной безопасности. Необходимо помнить, что у больных с выраженными иммунодефицитными состояниями пробиотические штаммы лактобацилл могут вызвать бактериемию [16].

Влияние пробиотиков на состояние кишечного эпителия. Важнейшим свойством пробитиков является их способность адгезироваться к кишечному эпителию. Они присоединяются к эпителию посредством гликоконъюгированных рецепторов, обеспечивая тем самым колонизационную резистентность и препятствуя адгезии и инвазии патогенов. На культуре колоноцитов Са-со-2 [17] было показано, что живые штаммы пробиотиков адгезируются к эпителию и вызывают тем самым: укрепление цитоскелета клеток кишечного эпителия (усиливается экспрессия тропомиозина ТМ-5, синтез актина и окклюзина); снижение проницаемости (повышается фосфорилирование белка межклеточных соединений); повышение синтеза муцина (стимуляция гена MUC-3); стимуляцию синтеза и активацию рецептора эпителиального фактора роста (EGF); увеличение синтеза полиаминов, являющихся гормоноподобными веществами, усиливающими процессы регенерации эпителия.

Все эти механизмы в конечном итоге способствуют повышению резистентности эпителия, усиливая его барьерные функции и защиту. Способность к адгезии in vitro отличается у разных представителей пробиотиков, она доказана у L. acidophilus и Bifidobacteriae [18]. По данным Juntunen M. с соавт. [19], она максимальна у LGG (34%), высока у В. bifidum (31%) и существенно ниже у L. acidophylus LA5 (4%), L. casei Shirota (1%), L. paracasei F-19 (3%). Способность к адгезии увеличивается при сочетании штаммов, в частности, при совместном применении LGG и В. bifidum адгезия нарастала до 39—44%. Это подтверждает наличие бактериального синергизма и делает предпочтительным применение препаратов, содержащих симбионтные штаммы пробиотиков. Способность пробиотиков оказывать воздействие на состояние кишечного эпителия позволяет рекомендовать их пациентам с хроническими заболеваниями кишечника, сопровождающимися воспалительными и строфическими изменениями его слизистой оболочки.

Влияние пробиотиков на иммунную систему. Адгезия пробиотиков к кишечному эпителию обеспечивает их взаимодействие с иммунной системой кишечника [20]. Некоторые микробные паттерны идентифицируются ею, в частности, микробные липополисахариды, гликопептиды и формилпептиды, которые покрывают мембрану, могут улавливаться TLR [21]. Сигналы патогенных микробов и представителей индигенной флоры воспринимаются этими рецепторами по-разному. При реакции TLR на соответствующий структурный паттерн разрывается его комплекс с ингибитором (Tollip), и TLR передает стимулирующий импульс на белок NFkB, вследствие чего последний транспортируется в ядро клетки [22]. Активация NFkB приводит к переключению дифференцировки Th0-лимфоцитов на Thl-путь и стимуляции выработки провоспалительных цитокинов. Назначение пробиотиков ингибирует активацию NFkB за счет предупреждения его ингибитора lkВ-α [23]. По-разному воспринимается и микробная ДНК патогенов и комменсалов. Олигонуклеотиды, в которых содержатся немеблированные динуклеотиды, что свойственно патогенной и условно-патогенной микрофлоре, улавливаются TLR с последующей стимуляцией воспалительного ответа. Эукариоидная ДНК и метилированные динуклеотиды, свойственные индигенной флоре, не воспринимаются TLR и не активируют иммунный ответ. Очевидно, что разные штаммы пробиотиков способны по-разному восприниматься GALT-системой, более того восприятие каждого из препаратов может быть индивидуально. Тем не менее, большинство проведенных клинических и экспериментальных исследований свидетельствуют о том, что пробиотические штаммы лактобактерий (LGG, L. acidophylus), Ent. faecium, Sir. thermophylus воспринимаются TLR и стимулируют воспалительный ответ, усиливая выработку Th1 и IL-1, INF-α. Они стимулируют фагоцитарную активность нейтрофилов и выработку SIgА. В то же время, бифидобактерии оказывают стимулирующее воздействие на Th-reg и , соответственно, выработку TGF-β, IL-10, то есть, способствует формированию иммунологической толерантности [24]. Этот процесс сопровождается снижением синтеза IgE и усилением синтеза SIgA. Наиболее активно повышают уровень IL-10 В. longum, B. bifidum, B. infantis [12]. Пробиотики, в состав которых входят симбионтные штаммы бактерий, аэробы и анаэробы, вероятно, могут оказывать более многоплановое и мощное иммуномодулирующее действие, чем монокомпонентные препараты [25]. Иммунорегулирующее действие пробиотиков расширяет возможности их использования и раскрывает широкие перспективы для применения в разных клинических ситуациях:

* При лечении хронических инфекций, вызванных:
o Helicobacter pylori
o Giardia lamblia
* Для лечения и профилактики пищевой аллергии
* При лечении воспалительных и других хронических заболеваний кишечника
* У часто длительно болеющих детей (ЧДБ)

Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) становятся все более частой патологией у детей. Этиология ВЗК остается не ясной, но доказан их иммунопатологический генез, предполагается нарушение взаимодействия GALT-системы и полостных антигенов. Эффективность пробиотиков при ВЗК была доказана рядом авторов [26—28], особенно для поддержания ремиссии при болезни Крона и лечения поушита [29]. В сравнении с плацебо, LGG оказались эффективны у 92 против 19%, E. coli Nissle — у 70 против 30%, S. boulardii— у 94 против 38%.

Другой растущей проблемой является пищевая аллергия. Возможности влияния пробиотиков на течение пищевой аллергии обусловлены несколькими механизмами, это: усиление барьерных функций кишечного эпителия и снижение его проницаемости; модификация аллергена за счет ферментации его микрофлорой; модуляция локального иммунного ответа.

В работах Isolauri E. (1996—2003) [30] было показано достоверное снижение проявлений атонического дерматита при длительном назначении детям LGG и В. lactis Вb12. В группе детей, получавших пробиотики, отмечено снижение СD4-лимфоцитов в крови и нарастание TGF-β. Профилактическая эффективность пробиотиков (LGG) в отношении развития атопии была доказана рядом авторов [8, 30]. Назначение LGG беременным женщинам с проявлениями атопии в анамнезе за 2—4 недели до родов и далее в течение 6 мес. на фоне кормления ребенка позволило снизить частоту развития пищевой аллергии у детей в 2 раза по сравнению с контрольной группой.

Показания к назначению пробиотиков. Учитывая многообразие механизмов действия пробиотиков, их возможности отнюдь не ограничиваются просто коррекцией кишечного биоценоза, показания к их назначению достаточно широки:

* Острые кишечные инфекции легкой и средней степени тяжести, особенно вирусные
* Затяжные диареи, обусловленные условно-патогенной флорой
* Антибиотикоассоциированная диарея — лечение и профилактика
* Инфекция Н. pylori — на фоне и после эрадикации
* Лямблиоз — на фоне и после лечения
* Воспалительные заболевания кишечника — поддержание ремиссии
* Пищевая аллергия — лечение и профилактика
* ЧДБ — на фоне и после лечения обострений хронических очагов инфекций, ОРВИ и их осложнений.

Учитывая различия в составе препаратов пробиотиков и строгие требования, которые предъявляются сегодня к ним, можно рекомендовать к применению у детей лишь те препараты, которые соответствуют этим требованиям и доказали свою клиническую эффективность в рандомизированных исследованиях. Современный пробиотик должен иметь:

* Живые бактерии штаммов:
o Lactobacillus acidophylus или Lactobacillus GG
o Bifidobacterium bifidum, longum, infantis
o Enterococcus faecium
* Сочетание симбионтных микробов
* Антибиотикоустойчивость
* Кислотоустойчивость

Этими свойствами обладают лишь немногие препараты. Примером пробиотического препарата, отвечающего современным требованиям, может служить Линекс®. В состав его входят L. acidophilus, B. infantis, Ent. faecium, содержание которых составляет не менее 107 микробных тел. Микроорганизмы, входящие в состав препарата, заключены в капсулу, которая раскрывается в желудке. Однако вследствие высокой кислотоустойчивости всех компонентов препарата, бактерии не разрушается в желудке, и препарат способен оказывать пробиотическое действие на всех уровнях желудочно-кишечного тракта. Сочетание в препарате лактобактерий и бифидобактерий с доказанными пробиотическими свойствами обеспечивает симбионтный эффект при колонизации толстой кишки, а наличие аэробного микроорганизма — энтерококка, способствует активному иммуномодулирующему и бактерицидному действию препарата на уровне желудка и тонкой кишки. Входящие в состав Линекса® микробы устойчивы к большинству антибиотиков, что позволяет использовать препарат на фоне антибактериальной терапии.

К сожалению, пробиотические штаммы, несмотря на многочисленные благоприятные эффекты, не эквивалентны собственной индигенной микрофлоре и не способны размножаться в кишечнике. Одной из причин этого может быть бионесовместимость с резидентными бактериями хозяина [31]. Даже наиболее эффективные пробиотики действуют только во время курса лечения и обнаруживаются в кале лишь в течение 3 — 7 дней после его окончания [32]. Поэтому для достижения устойчивого терапевтического эффекта, во-первых, необходим длительный или даже постоянный их прием, что практически невозможно. Во вторых, желательно, чтобы пробиотический препарат представлял собой штаммы нормобиоты, максимально совместимые с резидентными штаммами и местной иммунной системой.

ЛИТЕРАТУРА
1. Gorbach S. L. Probiotics andgastrointestinal health // Am. J. Gastroenterol. — 2000. — V. I. — S. 2—4.
2. Saavedra J. M. Clinical applications ofprobiotic agents // Am. J. Clin. Nutr. — 2001. — V. 73(6). —P. 1147S— 1151S.
3. Bezkorovainy A. Probiotics: determinants of survival and growth in the gut // Am. J. Clin. Nutr. — 2001. — V. 73. — S. 2. — P. 399S-405S.
4. Madsen K. I. The use ofprobiotics in gastrointestinal disease // Can. J. Gastroenterol. — 2001. — V. 15. — S. 12. — P. 817—22.
5. Jailasapathy K. Survival and therapeutic potential ofprobiotic organisms with reference to Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium spp. // Immunol. Cell Biol. — 2000. — V. 78. — S. 1. — P. 80—88.
6. Favier С F. Development of bacterial and bifidobacterial communities infeces ofnewborn babies / С F. Favier, W. M. De Vos, A. D. Akkermans // Anaerobe. — 2003. — V. 9. — P. 219—229.
7. Conditions of hifidobacterial colonization in preterm infants: a prospective analysis / M. J. Butel et al. // J. Ped. Gastroenterol. Nutr. — 2007. — V. 44. — № 5. — P. 577 — 582.
8. Хавкин А. И. Микрофлора пищеварительного тракта. — M.: Фонд социальной педиатрии, 2006. — 415 с.
9. Alvarez-Olmos M. I. Probiotic agents and infectious diseases: a modern perspective on a traditional therapy / M. I. Alvarez-Olmos, R. A. Oberhelman // Clin. Infect. Dis. — 2001. — V. 1. — S. 32 (11). — P. 1567—1576.
10. Resta-Lenert S. Live probiotics protect intestinal epithelial cells from the effects of infection / S. Resta-Lenert, К. Е. Barren / / Gut. — 2003. — V. 52. — S. 7. — P. 988—997.
11. Saaverda J. Probiotics and infectious diarrhea // Am. J. Gastroenterol. — 2000. — V. 95. — S. 1. — P. 16—18.
12. Нетребенко О. К. Пробиотики и пребиотики в питании детей грудного возраста // Педиатрия. — 2007. — Т. 86, № 1. — С. 80—87.
13. Alam N. Н. Treatment of infectious diarrhea in children / N. H. Alam, H. Ashraf // Paediatr. Drugs. — 2003. — V. 5. — S. 3. — P. 151—165.
14. Pochapin M. The effect ofprobiotics on Clostridium difficile diarrhea // Am. J. Gastroenterol. — 2000. — V. 95. — S. 1. — P. 11—13.
15. Probiotics in prevention of antibiotic associated diarrhoea: metaanalysis / A. L. D'Souza, С Rajkumar, J. Cooke, С J. Bulbitt // Brit. Med. J. — 2002. — V. 8. — S. 324 (7350). — P. 1361.
16. Конев Ю. В. Дисбиозы и их коррекция // Consilium medicum. — 2005. — Т. 7, № 6. — С. 432—437.
17. Cytoskeletal proteins and resident flora / L. Biancone et al. // Dig. Liver Dis. — 2002. — V. 34. — S. 2. — P. S34 — 36.
18. Kailasapathy K. Survival and therapeutic potential ofprobiotic organisms with reference to Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium spp. / K. Kailasapathy, J. Chin // Immunol. Cell Biol. — 2000. — V. 78. — S. 1. — P. 80—88.
19. Adherence ofprobiotic bacteria to human intestinal mucus in healthy infants and during rotavirus infection / M. Juntunen et al. // Clin. Diagn. Lab. Immunol. — 2001. — V. 8, S. 2. — P. 293—296.
20. Probiotics and immune response / S. Cunningham-Rundles et al. // Am. J. Gastroenterol. — 2000. — V. 95. — S. 1. — P. S22—25.
21. О роли антимикробных пептидов в механизмах врожденного иммунитета кишечника человека. Редакционная статья / / Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. — 2004. — № 3. — С. 2—10.
22. Xavier R. J. How to get along friendly microbes in a hostile world / R. J. Xavier, O. K. Podolski // Science. — 2000. — V. 289. — P. 1483—1484.
23. Petrof E. О. Probiotics inhibit nuclear factor-kB and induce heat shock proteins in colonic epithelial cells trough proteasome inhibition / E. O. Petrof, K. Kojima, M. Ropeleski // J. Gastroenterol. — 2004. — V. 127. — P. 1474—1487.
24. Mayer L. Oral tolerance: new approaches, new problems // Clin. Immunol. — 2000. — V. 94. — P. 1—8.
25. Effects of the probiotic formulation VSL3 on colitis in weanling rats / L. R. Fitzpatrick et al. // J. Ped. Gastroenterol. Nutr. — 2007. — V. 44. — № 5. — P. 561—570.
26. Kamm M. A. New therapeutic possibilities in inflammatory bowel disease // Eur. J. Surg. Suppl. — 2001. — V. 586. — P. 30—33.
27. The bacterial flora in inflammatory bowel disease: current insights in pathogenesis and the influence of antibiotics and pro-hiotics / R. K. Linskens et al. // Scand. J. Gastroentercl. — 2001. — V. 234. — P. 29—40.
28. Marteau P. Inflammatory bowel disease // Endoscopy. — 2002. — V. 34. — S. 1. — P. 63—68.
29. Effect of Lactobacillus rhamnosus GG on Heal pouch inflam mation andmicrobial flora / J. Kuisma et al. // Aliment. Phar macol. Ther. — 2003. — V. 15. — S. 4. — P. 509— 515.
30. Ouwehand A. The role of the intestinal microflorafor the de velopment of the immune system in early childhood / A. Ouwehand, E. Isolauri, S. Salminen // Eur. J. Nutr. — 2002. — V. 41. — S. 1. — P. 132—137.
31. Глушанова Н. А., Блинов А. И. Биосовместимость пробиотических и резидентных лактобацилл. Гастроэнтерология Санкт-Петербурга: Мат. 7-го Славяно-Балтийского научного форума Гастро-2005 / Н. А. Глушанова, А. И. Блинов. — С. 105.
32. Катт М. A. New therapeutic possibilities in inflammatory bow el disease // Eur. J. Surg. SuppL. — 2001. — V. 586. — P. 30—33.

Работ в текущем разделе: [ 299 ] Дисциплина: Биология На уровень вверх





Тип: Диссертация | Цена: 950 р. | Страниц: 118 | Формат: pdf, | Год: 2003 | В корзину | Купить





Также в разделе:
Комплексная оценка функционального состояния организма школьников начальный классов, имеющий нарушение письма
Комплексный анализ факторов, взаимосвязанный с реологическими свойствами крови у спортсменов
Компьютерное моделирование активный центров моноаминоксидаз и создание ингибиторов с заданной селективностью
Координация роста надземный органов и корневой системы у листовык мутантов горока в связи с содержанием АЕК в ик тканяк
Кормовая база, питание и пищевые отношения ранней молоди осетровых в Урало-Каспийском районе
КОРРЕКТИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ПРОБИОТИКОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИСБАКТЕРИОЗЕ
КОРРЕКТИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ПРОБИОТИКОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИСБАКТЕРИОЗЕ 03.00.07 - микробиология 03.00.15-генетика
Костномозговое кроветворение и иммунореактивность цыплят в норме и при вакцинации против инфекционного ларинготранеита на фоне применения витамина С
Красные водоросли в системе Биомониторинга суБлиторали Черного моря
КриптоБиоз каспийского лосося—кумжи Salmo trutta caspius Kessler
Лактазная недостаточность (первичная гиполактазия) в различный группан населения Евразии

Быстрый поиск в текущем разделе:




Содержание


3 ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ...6

ЧАСТЬ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава 1. Нормофлора и ее роль в обеспечении колоницационной резистентности организма...12

Глава 2. Адгезия как первый этап колонизационного процесса...22

Глава 3. Нарушения колонизационной резистентности - дисбиозы. Модели

дисбактеризов...29

3.1. Инфекции, вызываемые энтерогеморрагическими Escherichia coli...32

3.2. Урогенитальные инфекции, как следствие дисбиоза...37

Глава 4. Профилактика и лечение дисбиозов

4.1. Использование пробиотиков в терапии дисбиозов...40

4.2. Низкоинтенсивное импульсное лазерное излучение (НИЛИ) в терапии инфекционных заболеваний...45

ЧАСТЬ 2. СОБСТВЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ Глава 1. Материалы и методы

1. Материалы...49

2. Методы...53

2.1. Идентификация бактерий...53

2.2. Методы исследования бактериальной адгезии

2.2.1. Тест агрегации дрожжей...53

2.2.2. Тест «исследование адгезии к иммобилизированным субстратам» (Growth assay)...53

2.2.3. Обогащение культур микроорганизмов клетками, экспрессирующими пили

I типа...54

2.2.4.Радионуклеидное исследование адгезии...54

2.2.5. Формалинизация эритроцитов...55

2.2.6. Исследование адгезии к эритроцитам...55

2.2.7. Исследование адгезии микроорганизмов к клеткам защечного эпите- лия...56

2.2.8. Исследование связывание протеина FimH с пероксидазой хрена...57

2.2.9. Обработка ферментами ASG и РРО...57

2.2.10. Обработка НИЛИ...57

4

2.3. Определение антагонистической активности методом отсроченного антагонизма...57

2.4. Моделирование дисбактериоза у животных...58

2.5. Исследование транслокации кишечной флоры в органы и ткани...59

2.6. Методы работы с ДНК...59

2.6.1. Выделение плазмидной ДНК...59

2.6.2. Обработка ДНК...60

2.6.3. Методы введения генетического материала в клетку...61

2.6.3.1. Кальциевая трансформация...61

2.6.3.2. Конъюгация и мобилизация...62

2.7. Оценка продукции колицина и чувствительности бактерий к его действию

2.7.1. Тест с верхним агаром...62

2.8. Методы статистической обработки результатов исследований...63

Глава 2. Получение генноинженерных вариантов штамма E.coii M17

2.1. конструирование плазмид ColAmob и pCollacZ...64

2.2. получение штаммов E.coii M17/ pCollacZ, E.coii M17/ ColAmob, E.coii M17 fimH::npt/pCollacZ, E.coii M17fimH::npt/pColAmob...69

Глава З. Антагонистическая активность нормальной микрофлоры по отношению к патогенным Escherichia coli...71

Глава 4. Сравнительное исследование адгезивной активности различных групп

пробиотиков...76

Глава 5. Исследование влияния на уровень адгезии различных штаммов E.coii

физико-химических факторов...81

5.1. Влияние низкочастотного инфракрасного лазерного излучение на уровень

адгезии патогенных E.coii к различным субстратам...81

5.1.1. Исследование влияния НИЛИ на уровень жизнеспособности

¦ E.coii...81

\

\ 5.1.2. Влияние НИЛИ на уровень адгезии патогенных E.coii к эритроцитам...82

ц 5.1.3. Изменение адгезии патогенных E.coii под влиянием обработки НИЛИ

эритроцитов...84

5.1.4. Влияние НИЛИ на уровень адгезии патогенных E.coii к клеткам защечного эпителия...84

5

5.2. Влияние обработки ферментами L-Аспарагиназой и Полифенол оксидазой на уровень адгезии E.coli к различным субстратам...85

5.2.1. Определение бактерицидных свойств ферментов ASG и РРО...85

5.2.2. Определение эффективной антиадгезивной концентрации ASG и РРО.86

5.2.3. Исследование влияния ферментов L-Аспарагиназы и Полифенол оксида-зы на адгезию патогенных E.coli к эритроцитам...88

5.2.4. Исследование влияния ферментов ASG и РРО на адгезию патогенных E.coli к клеткам защечного эпителия...88

5.2.5. Исследование влияния ферментов ASG и РРО на адгезию E.coli в опытах "Исследования адгезии к иммобилизированным субстратам" и "радионуклеидном исследовании адгезии"...89

5.2.6. Исследование влияния ASG и РРО на величину связывания очищенного протеина FimH с пероксидазои хрена в реакции ELISA...92

5.3. Влияние комплексной обработки НИЛИ и ферментами ASG и РРО на уровень адгезии E.coli...93

5.4. Влияние НИЛИ и ферментов РРО и ASG на адгезивную активность пробио-тиков...98

Глава 6. Исследование защитного действия пробиотиков на модели in vivo

6.1. Отработка модели дисбактериоза на мышах...98

6.2. Моделирование инфекционного процесса, вызванного E.coli

О157:Н7...102

6.3. Использование пробиотиков для профилактики и лечения инфекции, вызванной E.coli 0157:Н7...103

ЗАКЛЮЧЕНИЕ...107

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ...118

6

Введение


ВВЕДЕНИЕ

Известно, что основной функцией нормальной микрофлоры человека является обеспечение колонизационной резистентности (КР) пищеварительного тракта. В обычных условиях поддержание КР микрофлорой осуществляется за счет продукции антибиотических веществ, конкуренции за места адгезии, подавления адгезии условнопатогенных бактерий, ингибирования транслокации и ряда опосредованных механизмов [88].

Факторы, способствующие нарушению состава микрофлоры и приводящие к развитию дисбактериозов, весьма многочисленны: это и прием лекарственных препаратов различных групп, стрессы, неблагоприятная экологическая обстановка, неправильный рацион питания, голодание. При антибиотикотерапии в первую очередь в нормобиоценозе исчезают "нормальные" кишечные палочки, и их место занимают условно патогенные и патогенные эшерихии, способные вызывать как местные, так и генерализованные инфекционно-воспалительные процессы. Причиной и характерным признаком дисбактериоза является избыточный рост патогенных и условно патогенных микроорганизмов в биотопе, что, в свою очередь, способствует их колонизации в нетипичных эконишах. Поэтому до настоящего времени актуальным является исследование и разработка новых подходов к коррекции дисбактериозов, одним из которых является разработка новых пробиотиков (ПБ), в том числе на основе нормальной кишечной палочки. Одним из первых отечественных ПБ является колибактерин. Штамм E.coli А. Ниссле [45], входивший в состав колибактерина, за годы эксплуатации утратил плазмиду, детерминирующую колициногенность, в связи с чем снизил антагонистическую активность в отношении ряда бактерий, чувствительных к действию колицина [64].

Считается, что основным требованием при подборе производственных штаммов для препаратов - ПБ должна быть их высокая колонизационная активность [131,132]. При этом особое внимание следует обращать на такие факторы колонизации как антагонистическая и адгезивная активности.

Адгезивная активность является первым этапом развития колонизационного процесса и в большинстве случаев желательна для ПБ, тогда как у патогенных микроорганизмов рассматривается в качестве одного из стартовых механизмов развития инфекции. Таким образом, при подборе ПБ для коррекции дисбиоза, вызванного тем или иным патогеном, целесообразно сравнение адгезивных свойств патогена и

ПБ с целью выяснить, может ли данный ПБ конкурировать с патогеном за субстраты связывания и тем самым препятствовать колонизации последнего в организме.

Одной из важнейших задач при коррекции дисбиозов является удаление патогенов из экониш. Блокирование адгезии патогенов к субстратам связывания может предотвратить развитие инфекции на раннем этапе. Из литературы известны вещества, способные блокировать адгезию микроорганизмов, среди которых пептиды, моно и олигосахариды, ферменты, в том числе полифенол оксидаза (РРО). Известна так же способность физических факторов таких, как ультразвуковое воздействие, низкоинтенсивное лазерное излучение (НИЛИ), снижать адгезивную активность. Но если блокирование адгезии патогенов целесообразно, то снижение адгезивности нормальной флоры нежелательно, в ряде случаев это может привести к неблагоприятным последствиям. Отсюда очевидна актуальность поиска агентов, способных избирательно ингибировать адгезивность патогенов, воздействуя при этом незначительно на нормофлору.

Имеется положительный опыт применения низкоинтенсивного импульсного лазерного излучения (НИЛИ) в различных областях медицины, в частности в урологии для лечения инфекционно-воспалительных заболеваний. Опубликован ряд работ, посвященных воздействию НИЛИ на организм человека и на отдельные его клеточные субпопуляции, но о воздействии НИЛИ на микроорганизм сведений в литературе очень мало. Известно только, что достигаемая с помощью такого лечебного воздействия быстрая санация мочевыводящего тракта у больных позволяет предположить возможное воздействие НИЛИ не только на макроорганизм, но и на микроора-низмы.

В настоящее время при доклиническом изучении ПБ руководствуются, в основном, методами in vitro, так как отсутствует эффективная экспериментальная модель дисбактериоза на животных. Наиболее информативная - модель на гнотобио-тических животных. Однако работа с ними требует наличия специальных условий и оборудования. Поэтому, предложено несколько способов моделировать дисбакте-риоз у «микробных» животных. Дисбактериоз вызывается посредством тотальной кровопотери, голодания, стресовых ситуаций, радиационного облучения, приема антибиотиков. Последний способ изучался В.Г. Лиходедом с соавт. [28,34,60]. Ими в частности было доказано, что введение мышам больших доз ампиокса сопровождается значительным снижением клеточного и гуморального антиэндотоксинового иммунитета.

8

Учитывая всё вышеизложенное, настоящая работа преследовала цель изучить корректирующее действие ПБ при экспериментальном дисбактериозе. Для достижения поставленной цели последовательно решались следующие задачи:

1. Сконструировать на базе известной плазмиды Со1Е1 гибридные плазмиды, несущие детерминанту синтеза колицина и лишенные генов mob, контролирующих конъюгативную мобилизацию плазмиды.

2. Получить и исследовать новые рекомбинантные варианты производственного штамма М-17 способные к продукции колицина Е1.

3. Изучить антагонистическую активность новых рекомбинантных ПБ в отношение патогенных клинических штаммов E.coli, выделенных от пациентов с дисбиоза-ми.

4. Провести сравнительное изучение адгезивной активности ПБ различных групп (бифидо, лакто, колисодержащих, споровых и грибов) и клинических штаммов E.coli, выделенных от пациентов с дисбиозами.

5. Изучить влияние физико-химического воздействия (НИЛИ и ферментов L-аспарагиназы (ASG) и полифенол оксидазы (РРО)) на адгезию микроорганизмов.

6. Разработать адекватную модель дисбактериоза для оценки эффективности ПБ на животных.

7. Изучить защитное действие ПБ при экспериментальном дисбактериозе у животных.

Научная новизна:

1. Впервые на основе родительской плазмиды Со1Е1 получены новые плазмиды pCollacZ и СоЩтоЬ, а так же рекомбинантные штаммы, содержащие полученные плазмиды: E.coli M-17/pCollacZ, М-17 fimH::npt/pCollacZ, М-17/Со1ДтоЬ, М-17 fimH::npt/Colflmob, Штаммы обладают способностью к продукции колицина Е1, при этом сконструированные плазмиды лишены mob области и вследствие этого не способны к мобилизации конъюгативными плазмидами.

2. Впервые изучена антагонистическая активность новых рекомбинантных штаммов и коммерческих ПБ различных групп в отношении клинических штаммов E.coli, выделенных от пациентов с дисбиозами.

3. Впервые исследовано влияние НИЛИ на адгезивные свойствы E.coli и установлена бульшая чувствительность патогенов к антиадгезивному действию НИЛИ по сравнению с ПБ.

4. Впервые исследовано влияние ферментов ASG и РРО на адгезивную активность микроорганизмов и установлена бульшая чувствительность патогенов к антиадгезивному действию ферментов по сравнению с ПБ.

5. Разработана модифицированная модель экспериментального дисбактериоза на животных. При этом для доказательства наличия дисбактериоза впервые использован штамм E.coli О157:Н7 (212), вызывающий геморрагический колит.

6. Впервые предложен способ коррекции геморрагического колита с помощью ПБ: генноинженерных вариантов штаммов М-17, а так же коммерческих препаратов -биофлора, биоспорина, лактобактерина, колибактерина.

Практическая значимость.

1. Представлены новые научные данные о механизме защитного действия ПБ.

2. Предложена новая модель для изучения дисбактериоза с использованием мышей. Доказана эффективность применения ПБ для профилактики и лечения дис-бактериозов на этой модели.

3. In vitro доказана возможность комплексного использования ПБ, НИЛИ и ферментов РРО и ASG для предотвращения колонизации патогенов.

4. Получены новые рекомбинантные варианты пробиотического штамма E.coli M-17, обладающие способностью синтеза колицина Е1, которые могут быть использованы для разработки пробиотических препаратов.

Полученные данные можно использовать в лекционном материале по микробиологии в разделах нормальная флора, дисбактериозы и пробиотики. Положения, выносимые на защиту.

1. Сконструированные плазмиды pCollacZ и СоЩтоЬ содержат детерминанту синтеза колицина Е1 (сеа), ген иммунности к нему (imm), не способны к мобилизации конъюгативными плазмидами (не содержат mob области), стабильно поддерживаются в популяции (за счет наличия гена сег) и пригодны для использования в качестве факторов, придающих родительскому штамму E.coli M 17 способность к синтезу колицина Е1 и вследствие этого повышенную антагонистическую активность в отношении патогенов.

2. Полученные рекомбинантные штаммы, а так же колисодержащие ПБ в опытах in vitro проявляют высокий уровень антагонистической активности в отношении клинических штаммов патогенных E.coli , выделенных от больных с дисбиозами, тогда как споровые пробиотики и энтерол обладают низким уровнем антагонизма в отношение изучаемых штаммов.

10

3. Воздействие НИЛИ блокирует адгезины уропатогенных E.coli, и тем самым предотвращает колонизацию этих патогенов в организме. Обработка эритроцитов НИЛИ приводит к ингибированию рецепторов, что также выражается в частности снижением адгезии. Патогенные E.coli в значительной мере более чувствительны к воздействию НИЛИ, чем представители нормофлоры.

4. Ферменты ASG и РРО обладают свойством снижать уровень адгезивности микроорганизмов на различных моделях и экспериментах in vitro: иммобилизирован-ные субстраты, эукариотические клетки (эритроциты и клетки защечного эпителия) и др. ПБ значительно менее чувствительны к воздействию ферментов по сравнению с патогенными E.coli.

5. Получена адекватная модель дисбактериоза у животных для исследования эффективности ПБ. В качестве маркёра наличия дисбактериоза использован штамм E.coli 0157:Н7.

6. ПБ обладают протективным действием в отношении клинического штамма E.coli О157:Н7 на модели in vivo.

Апробация работы. Результаты исследований были доложены на научно-практических конференциях НПО "Биомедицинские технологии" (Москва, 2000, 2002, 2003), на международной научно-практической конференции памяти Г.И. Гончаровой (Москва, 2002) и на заседаниях кафедры микробиологии и биологии медицинского факультета РУДН (Москва, 2000, 2001, 2002, 2003). Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ. 1.Т.В. Колганова, И.Г. Осипова, М.В. Далин, X. Ватанабе, Е.А. Васильева, В.Л. Чес-нокова, В.Ф. Евлашкина, Э.Г. Кравцов, Н.Ю. Абрикосова, О.Ю. Лукьянова. Некоторые механизмы взаимодействия пробиотиков с веротоксинпродуцирующими Escherichia coli 0157: Н7//сб. Биотехнология, Москва, 2000, №13, с. 69-76. 2.Адгезивная активность пробиотиков, применяемых в гинекологической практике/ И.Г. Осипова, Л. Созаева, В.Ф. Евлашкина, Е.А. Васильева, О.Ю. Лукьянова, Т.В. Чумаева, Т.В. Колганова. // сб. Биотехнология Москва, 2001, №16, с. 35-39. З.Т.В. Колганова, X. Ватанабе, М.В. Далин, Е.А. Васильева, И.Г. Осипова, В.А. Лившиц, О.Ю. Лукьянова, В.Ф. Евлашкина К вопросу о механизме защитного действия пробиотиков//сб. Биотехнология, Москва, 2001, №16, с. 23-28. 4.Т.В. Колганова, А.В. Ермолаев, Р.Дж.Дойл. Влияние ферментов аспарагиназы и полифенолоксидазы на адгезивные свойства микроорганизмов// БЭБ, 2002, № 1, с. 71-74.

11

5.Т.В. Колганова, Т. Джарадат, Т.В. Чумаева, И.Г. Осипова и др. К вопросу о воздействии импульсного инфракрасного лазерного излучения и пробиотиков на штаммы Escherichia coli, выделенные от людей с заболеваниями мочевыделительной системы// международная научно-практическая конференция памяти Г.И. Гончаровой, Сб. материалов, Москва, 2002, с. 25.

6. Изучение адгезивной активности пробиотиков различных лекарственных форм, применяемых в гинекологической практике/ Т.В. Чумаева, И.Г. Осипова, Е.А. Васильева, Т.В. Колганова, О.В. Золотарева, С.Э. Саркисов// международная научно-практическая конференция памяти ГИ Гончаровой, Сб. материалов, Москва, 2002, с. 24.

7.Т.В. Колганова, Т. Джарадат, А.В. Ермолаев, И.Г. Осипова, Е.А. Васильева, М.В. Далин, Р.Дж. Дойл. К вопросу о комплексном воздействии импульсного инфракрасного лазерного излучения и аспарагиназы на штаммы Escherichia coli, выделенные при заболеваниях мочевыделительной системы// БЭБ, 2002, т. 133, №6, с. 681-683.

8.Т. В. Колганова, Т. Джарадат, А. В. Ермолаев, И.Г. Осипова, Е.А. Васильева, М.В. Далин, Р.Дж. Дойл. К вопросу о комплексном воздействии низкочастотного лазерного излучения и полифенолоксидазы на адгезивную способность штаммов Escherichia coli, выделенных при заболеваниях мочевыделительной системы у людей// БЭБ, 2002, т. 134, №7, с. 190-192.

9.Изучение адгезивной активности пробиотиков различных лекарственных форм, применяемых в гинекологической практике/ Т.В. Чумаева, И.Г. Осипова, Е.А. Васильева, Т.В. Колганова., О.В. Золотарева, С.Э. Саркисов // сб. Биотехнология Москва, 2002, №19, с. 100-103.

Объем и структура работы. Диссертация изложена на стр. машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов экспериментальных исследований и их обсуждения, заключения, выводов и библиографического указателя, включающего источников. Работа иллюстрирована рисунками и таблицами.

12

ЧАСТЬ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. НОРМОФЛОРА И ЕЕ РОЛЬ В ОБЕСПЕЧЕНИИ КОЛОНИЦАЦИОННОЙ

РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА

Термин колонизационная резистентность (КР) впервые введен Van der Waaij D., под ним понимают совокупность взаимосвязанных физиологических, микробиологических и иммунологических факторов организма, препятствующих колонизации организма патогенами [14]. КР обеспечивается за счет нормальной перистальтики кишечника [194], препятствующей избыточной колонизации тонкой кишки, а так же благодаря нормофлоре, играющей в поддержании КР основную роль [88].

Нормальной следует считать эволюционно сложившуюся микрофлору, которая формировалась во взаимодействии с организмом человека в течение основного периода его существования как биологического вида [55].

До настоящего времени нет общепринятой классификации нормальной микрофлоры [180], однако, чаще всего принято подразделять нормальную микрофлору кишечника здоровых людей и животных на индигенную, транзиторную и факультативную. Нормофлору подразделяют так же на облигатную и факультативную. Количество и функции основных представителей нормофлоры приведены в таблице 1. В то время, как роль транзиторной микрофлоры в настоящее время активно изучается, основная функция индигенной микрофлоры известна и заключается в поддержании КР. Микроорганизмы индигенной микрофлоры в составе биопленки в сотни раз более устойчивы к воздействию неблагоприятных факторов по сравнению с бактериями находящимися в просвете кишечника. Микрофлора характеризуется неоднородностью и относительным постоянством в разных отделах желудочно-кишечного тракта. Подсчитано, что в кишечном тракте взрослого человека количество микроорганизмов составляет 1013, т.е. почти равно числу клеток всех тканей и органов макроорганизма [61]. О многокомпонентности микрофлоры человека говорит хотя бы тот факт, что в 1.0 г содержимого слепой кишки обнаруживается около двух биллионов микроорганизмов, представителей 17 различных семейств, 45 родов и свыше 400 различных видов [17,138,158]. Количество индигенных видов среди них невелико, но численность их значительна [49], и они, колонизуя поверхность клеток слизистой, обитают в толще слоя муцина, покрывающего эпителий.

Муцин в комплексе с бактериями представляет собой специфическую биопленку, защищающую энтероциты от действия чужеродных агентов [16,62,81]. Доказано свойство бактерий нормофлоры индуцировать экспрессию гена, кодирующего синтез

13

Таблица 1.

Количественное содержание и функции представителей микробиоценоза кишечника и их функции в поддержании КР

Наименование микроорганизма

Количество микроорганизмов в 1г фекалий

Функция микроорганизма

человека

Bifldobacterium

(большинство bifi-

dum)

109-1010

мышеи

109-1010

то о. о Lactobacterium sp. 106 -108 10е

иикрофл!

Облигатная i PropionobacteriuirT .,___ acnes v...,jai To6-107 107* -108 НД

Escherichia coli 106- Щ 107* : -in6 лп7

106-107*

«щ ^«."•г.-ъг^-г-'-тЩ fif'"

Enterococcus sp.

105-106

10s- 10е

Streptococcus sp. 105 -106

¦9-g.

Bacteroides

107-1011

107-'

Peptococcus Staphylococcus

Bacillus

§ Дрожжеподобные

105-106

Значит. Кол-ва

Физиологическая защита кишечного барьера от проникновения микробов и токсинов внутрь организма; выработка жир» ных кислот; активация пристеночного пищеварения; синтез АК, витаминов; усиление всасывания ионов металлов и вит; D; иммуномодулирующее действие — препятствуют дегра» дации slgA, стимулируют интерферонообразование и вырабатывают лизоцим, ... ... а

Продуцируют молочную кислоту, перекись водорода пиру-ват, ацетат, пропионовую кислоту, манитол, низин; высокая антагонистическая активность против протея; иммуномоду-ляция — стимуляция фагоцитарной активности нейтрофи-лов, макрофагов, синтеза иммуноглобулинов, образование интерферонов, ИЛ I, фактора некроза опухоли а; рециркуляция желчных кислот и холестерина; сохранение балланса состава микробных популяций после приема антибиотиков.

Нормальные кислотообразователи, обладают антагонисти* ческим действием в отношении патогенов. j

С нормальной фер-Стимулируют антителообразование и ментативной актив- оказывают иммномодулирующее дей-Ljn^r^^ ствие; способствуют гидролизу лакто-

зы; синтез витамино (особенно вит. К) Со сниженной фер- вырабатывают колицины; способству-ментативной актив-ют активации гуморального и местного ностью иммунитета; пристеночно расположен-

ные E.coli характеризуются низкой метаболической активностью и репродук-тивностью, что делает их менее уязвимыми к действию ряда антибиотио-тиков.

* Общее их количество не должно привышать количество ки! шечных палочек. Обладают антагонистичестой активностью в отношении патогенных микроорганизмов ...__?

Пептострептококки — образуют водород, превращающийся в нерикись, тем самым поддерживают кислый рН, участвуют в протеолизе белков молока, ферментации углеводов. Непатогенные стрептококки способствуют выработке Ig. Расщепляют желчные кислоты, участвуют в процессе ли^

»пидного обмена ...„,,...,.,..__.; ...,_,,...„„.„...,.. ,„,:„,,... ,^_._ ,.,,.j

Метаболизируют пептон и АК с образованием жирных кислот, вырабатывают широкий спектр органических кислот

Лактозонегативные

10"

103

10ь

Антагонистическая активность к широкому спектру патогенных и условно патогенных микроорганизмов, высокая ферментативная активность, противоаллергенное и антитоксическое действие

a; (D

ca

«5

Proteus

Klebsiella, Serracia, ь Citrobacter etc. «^

Fusobactreiun,

eubacteriun, cathe-

nobacterim etc.

<104 <105

Участвуют в синтезе пептидаз, расщепляющих коротки пептиды до АК

14

кишечного муцина MUC2 and MUC3, причем экспрессия наблюдалась лишь в клетках линии НТ-29 (кишечный эпителий), тогда как клетки неинтестинальной линии НЕр-2 в тех же условиях продуцировали лишь минимальное количество MUC2 mRNA и не продуцировали MUC3 mRNA. Добавление в среду MUC2 и MUC3 муцинов понижала уровень адгезии патогенных кишечных палочек к эукариотическим клеткам, как первой, так и второй линии [81,168,170]. Важнейшим механизмом обеспечения КР является конкурирующее действие микроорганизмов за экологическую нишу, осуществляющееся благодаря проявлению бактериями нормофлоры разнообразных свойств [183,189,201,240].

Бактерии нормофлоры обладают антагонистической активностью в отношении патогенных микроорганизмов. Понятие антагонистической активности очень широко и складывается из многих составляющих, среди которых более высокая скорость размножения бактерий нормофлоры, более широкий набор ферментов, а также продукция различных бактерицидных и бактериостатических субстанций [184,197]. Среди таких веществ, продуцируемые лакто и бифидобактериями органические жирные кислоты, обладающие высокой антагонистической активностью по отношению к патогенам. Лактобактерии, бифидобактерии и особенно кишечная палочка способны к синтезу бактериоцинов - естественных антибиотикоподобных веществ [164,223]. Так субстанции, выделяемые бифидобактериями, ингибируют рост таких патогенных бактерий, как сальмонеллы, клостридии, листерии. Бактериоцины, продуцируемые лактобактериями (гельветицин, лактобревин, булгарицин, реутерин, лактоцины, плантарицин, лактолин.лактоцидин) способны подавлять размножение широкого спектра микроорганизмов: клостридии, стрептококков, энтеробактерий, листерии, грибов рода Кандида и др. [197,220]. Первый из известных бактериоцинов, продуцируемый энтеробактериями, - колицин обладает мощным ингибирую-щим действием в отношении бактерий семейства Enterobcteriacaea. Важным свойством бактерий, вырабатывающих бактериоцины является их устойчивость к синтезируемым субстанциям.

Способность к образованию колицинов не является постоянным свойством бактерий вида E.coli. Она связана с Col-факторами (или Col-плазмидами). Существует классификация колицинов по перекрестной устойчивости/ толерантности бактерий, однако это свойство отражает не столько организацию самого колицина, сколько свойство бактериальной клетки в целом. По генетическим характеристикам самих колицинов, механизму их действия на бактериальную клетку была предложена их классификация (таблица 2) [59].

15

Таблица 2 Некоторые типы колицинов и их характеристики

f колицин^группа""Механизм действия"™**" Число дк w Молекулярная масса 1

Е1 А Деполяризация 522 57.279

мембраны

А А Тоже 592 62.989

К А То же ND Ок. 69.000

L ... la ,_11_В .^ыТожв...___.__„_:.1^ .._ ND .,...___...Ок. 79.000 ,... J

Ib В То же ND Ок. 80.000

I. „,. Е2 ._лй...,. В...^ДНК-эндонуклеаза ,,..„.. ,.„„..,„ 581 .„.._*„_.,... 61.561 .,..._...J

ЕЗ В Инактивация рибосо- 551 57.962 мального синтеза

Г' ^" """" В "™ГТОЖв ...:,-.,r~~.,~r^~..-:~.~»v-...-• -г ...^ГГ- -г-:-... С

Колицины - это белки. В небольших количествах они присутствуют в супернатанте соответствующей колициногенной культуры. Продукция колицинов повышается на несколько порядков при индукции, т. е. при воздействии на колициногенные бактерии таких агентов, как УФ и радио- излучение, митомицин С. Роль генетической системы lexA доказывается наличием в промоторе гена продукции колицина сайта связывания с белком LexA [124]. Синтез колицина летален: продуцирующая колицин клетка гибнет. Открытие генов лизиса, являющихся частью того же оперона, что и гены продукции колицинна, показывает, что, пока существует иммунность, летальный эффект не связан с действием самого колицина. Наиболее изученным количи-ном является колицин Е1, синтез которого кодирует плазмида Со1Е1, основные гены которой и выполняемые ими функции представлены в таблице 3.

Антагониститческая активность бактерий нормофлоры доказана в экспериментах in vitro, с использованием методов отсроченного антагонизма, совместного культивирования, а так же in vivo [15,120]. Выяснению существенных деталей антагонистических взаимоотношений между микроорганизмами кишечного биоценоза способствует проведение экспериментов на моделях, с использованием перевиваемых клеточных культур, развивающихся куриных эмбрионов, изолированной петли кишечника, кератоконъюнктивальной пробы и др. [54].

Установлено участие бактерий нормальной микрофлоры в ферментативной деятельности пищеварительного тракта. И, хотя некоторые из ферментов могут играть роль проканцерогенов, их мутагенная активность тесно связана с характером субстрата и является субстрат - индуцированной. Продуцируемые нормальной микрофлорой органические кислоты, особенно ацетат и бутират, напротив, являются антиканцирогенами. Способность бактерий нормофлоры синтезировать ферменты,

16

Таблица 3. Основные гены плазмиды Col E1 и их функции

Ген Функция i

ori Точка начала репликации

гот Продукт - белок, модулирующий связывание РНК I с РНК II, обеспечивающее

прохождение репликации. При отсутствии гена гот происходит накопление ь... .. а молекул плазмидной ДНК в клетке. . *

bom и mob mob кодирует синтез белков, с помощью которых производится однонитиевый разрыв ДНК в области bom. Во время конъюгации, инициированной конъюга-тивной плазмидой, нить с разрывом образует комплекс с белком Mob, что обеспечивает мобилизацию плазмиды через канал, возникший в процессе конъюгации, в клетку - реципиент. *сег ""Обеспечивает поддержание плазмидного мономера, что обеспечивает боль-1

к^,-,:,.,.»^..:^^шУЮ копийность плазмиды в кпетке..^,„,.^^^..^_^^,...ж,,„=.„.;;,.^^ч,„„...„._«...,.¦..,,,„,2

ехс Обеспечивает несовместимость уже присутствующей в клетке плазмиды с

любой другой родственной плазмидой.

Гсеа-kill "г""щ "Продукт - белок КОЛИцИН^'™те<-""'"...¦¦ • •*""- —*-———-—-. >-?- - ¦,...-..-. ^

расщепляющие сахара, особенно лактозу, крайне важна у младенцев с лактазной недостаточностью и при неинфекционных заболеваниях кишечника, например, болезни Крона [38,45,61,62]. Важную роль играет микрофлора кишечника в метаболизме белков, азот- и углеродсодержащих соединений, липидов, желчных кислот, холестерина, ряда и микроэлементов. Микрофлора кишечника участвует во всасывании солей кальция и железа, регулирует моторную активность толстой кишки, поддерживает водный, газовый, ионный гомеостаз организма, связывает и разрушает токсические субстанции, инактивирует избыток пищеварительных ферментов [38,45,61,62]. Большое значение предается нормофлоре кишечника в защите организма от токсических элементов экзогенного происхождения. Микрофлора кишечника совместно с системами энзимного и иммунного гомеостаза участвует в активации или инактивации лекарственных препаратов, в частности антибиотиков. Бактериальной флоре пищеварительного тракта свойственно участие в синтезе витаминов, в первую очередь витамина К, витаминов группы В. Нормофлора способствует всасыванию витамина D [15,35,45,47].

Важным вкладом бактерий нормальной микрофлоры в обеспечении КР организма является их иммуномодулирующее действие. Установлено влияние низкомолекулярных метаболитов, продуцируемых микрофлорой, на синтез и накопление в кишечном соке секреторного IgA. Непосредственным стимулом пролиферации синтезирующих IgA клеток в слизистой кишечника являются микробные антигены. Бак-

17

терии нормофлоры повышают фагоцитарную активность макрофагов и нейтрофи-лов; признана их способность модулировать гуморальный иммунитет, число В лимфоцитов и уровень специфических антител; тогда как в вопросе о регуляция Т клеточного иммунитета и продукции цитокинов единого мнения нет. Ценным свойством бактерий нормофлоры является модулирующее действие на продукцию интерфе-ронов: так имеются данные о противовирусном действии L. casei в отношении цито-мегаловируса [35].

Одна из основных функций индигенной нормофлоры, обеспеченивающая колонизационную резистентность макроорганизма - адгезия микробов к рецепторам слизистой оболочек кишечника. Способность штаммов нормофлоры связываться с теми или иными рецепторами поверхности слизистой обеспечивает конкуренцию за эти рецепторы с патогенными и условно-патогенными микроорганизмами. Микроорганизмы, составляющие нормальную микрофлору, могут находиться как на поверхности слизистой оболочки кишечника, будучи интимно с ней связанными (индиген-ная, мукозная или М-флора), так и в просвете кишки (просветная, полостная или П-флора). Представители М-флоры фиксируются к строго определенным рецепторам эпителиальных клеток [233]. Число таких рецепторов на эпителиальных клетках ограничено. Это подтверждается наблюдениями, свидетельствующими о том, что предварительная обработка мишеней лектином КонА или адгезинами бактерий резко снижает количество микроорганизмов, способных фиксироваться на преинкуби-рованных клетках. Считается, что адгезированные бактерии нормофлоры «блокируют» рецепторы эукариотических клеток, делая их недоступными для связывания с патогенными агентами [186]. Механизмы, отвечающие за процесс специфической адгезии индигенных микроорганизмов, в последние годы интенсивно исследуются. Установлено, что одним из элементов, ответственных за нее, являются поверхностные структуры бактерий, содержащие адгезины, которые комплементарны соответствующим рецепторам, расположенным на мембранах эпителиоцитов. Адгезины могут быть локализованы в мембранах бактерий, на их поверхности, а также на специфических фимбриях, которые способны, пенетрируя сквозь толщу экзополисаха-ридного гликокаликса, фиксировать бактерии на соответствующих рецепторах. Адгезия бактерий может осуществляться и к рецепторам, локализованным в муцино-вом слое прикрытых другими микроорганизмами (опосредованная адгезия). При этом едва уловимые изменения в рецептор-связывающем участке адгезина могут оказать значительное влияние на тропизм адгезирующего микроба. Своеобразие рецепторов детерминируется генетически у каждого индивидуума, о чем свидетель-

18

ствует наличие почти полностью идентичной анаэробной и аэробной флоры у однояйцовых, но не у разнояйцовых близнецов человека [15,62].

Существует три варианта методических подходов к изучению in vitro адгезии микробных клеток к мишеням. Первый предполагает регистрацию факта взаимодействия клеток с помощью светового микроскопа. Второй включает приемы культивирования для учета жизнеспособных микроорганизмов, прикрепившихся к клеткам-мишеням. Третий предусматривает введение изотопной метки ( 3Н или 18С ) и дальнейший учет связавшихся микробных клеток по этой метке.

В норме, находясь в состоянии динамического равновесия, представители кишечной микрофлоры не оказывают отрицательного влияния на организм. Однако, вследствие различных нарушений (сдвиг иммунологического статуса, приема антибактериальных препаратов, инфекционный процесс, стресс, травма и т.д.) бактерии нормофлоры начинают усиленно размножаться и могут заселять нетипичные для них экологические ниши, становясь причиной аутоинфекций [44,246,270,271]. Перенос интестинальных бактерий через слизистую оболочку кишечника, их прохождение через систему мезентериальных лимфатических узлов и воротной вены печени в органы получил название транслокации [41,90,149,186,270,271]. Термин транслокация впервые появился в 19 веке (С. Edmiston и R. Condom), в 1973 году Затула СР. и Резник СР. показали, что введенные per os Bacillus subtilis могут проникать в органы и кровь животных [54]. В 1979 году R. Berg A. Garlington на гнотобиотической модели обнаружили транслокацию индигенной микрофлоры кишечника в мезенте-рилаьные лимфатические узлы и другие экстраинтестинальные органы [90]. Позднее, в 1985 году Никитенко В. продемонстрировал транслокацию бактерий из желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) в рану и окружающие ее ткани [41]. Описаны три главные причины, содействующих бактериальной транслокации из ЖКТ: резкое увеличение количества бактерий в ЖКТ, иммунодефицит, повышение проницаемости слизистого барьера кишечника. Из аутофлоры наиболее часто транслоцируется кишечная палочка, протей и энтеробактерии, из транзиторных штаммов - сенная палочка. Следующими в ряду идут грамположительные аэробы. Уровень транслокации облигатных анаэробов очень низок [41,90]. Представители достаточно экологически пластичного вида E.coli, попадая из обычного для них биотопа толстого кишечника и илеоцекальной области подвздошной кишки в иные органы (вышележащие отделы кишечного тракта, кровь, урогенитальную и дыхательную систему) расценивается как признак кишечного дисбактериоза и симптом внекишечного эшери-хиоза [47]. Уровень транслокации грамотрицательной микрофлоры у мышей в ме-

19

зентериальные узлы увеличивает пероральное введение антибактериальных препаратов, снижающих количество анаэробных бактерий (пенициллин, метронидазол, клиндамицин); антибиотики, снижающие уровень аэробной микрофлоры, напротив уменьшают транслокацию [90,149]. Транслокация происходит более выражено за счет таких факторов, как геморрагический шок, кишечная непроходимость, опухоли, нарушения целостности слизистой кишечника и многих других [90].

Эшерихии способны вызывать диареи (острые кишечные инфекции - ОКИ). Группа патогенов, вызывающая ОКИ, неоднородна и включает в себя несколько подгрупп эшерихии, в том числе энтероинвазивные, энтеротоксигенные, энтеропа-тогенные, энтероаггрегативные и энтерогемоорагические E.coli. Все эти варианты ОКИ различаются по патогенезу, клинике и др. Эшерихии могут стать причиной вне-кишечных инфекций, таких как сепсис, менингит, HUS, UTI и т. д. При UTI кишечная палочка является основным этиологическим фактором, она высевается у больных в 95 % случаев, часто в микробных ассоциациях (кишечная палочка, стафилококк, протей и др.). Считается, однако, что представители индигенной микрофлоры не могут вызвать инфекционный процесс, даже попав за пределы кишечника, поскольку быстро разрушаются иммунной системой человека, а заболевания вызывают лишь истинные патогены (возбудители ОКИ) и условные патогены [19]. Такая гетерогенность рода Escherichia должна очень четко приниматься во внимание при разработке препаратов - ПБ на основе кишечной палочки, поскольку некоторые на первый взгляд желательные характеристики потенциального ПБ могут служить в организме человека фактором патогенности. Например, доказано, что высокоадгезивные варианты штамма E.coli - Мн (имеющие высокое связывание с РНКазой В и маннаном) хорошо заселяют кишечник, но при этом представляют собой потенциальных возбудителей заболеваний мочевыделительной системы, предоминантными же штаммами интестинальной ниши были варианты ML (высокое связывание с РНКазой В и низкое с маннаном) [59].

Потенциальную опасность у лиц с иммунодефицитами могут представлять бактерии рода Lactobacillus. Поскольку лактобактерии на сегодняшний день относятся к числу приоритетных для производства ПБ, проблеме их потенциальной безопасности посвящено множество публикаций [80,82,126,147,179,192,218,251]. Лактобактерии разных видов высеваются из инфицированных ран, часто в комплксе с другими микроорганизмами [67,148,229,279], могут обнаруживаться на клапанах сердца при бактериальном эндокардите, высеваются при нефритах, хондритах. Обитающие в ротовой полости лактобактерии могут стать причиной развития парадонтоза и кариеса

20

[226,246]. Интересен тот факт, что выделенный из крови при бактериемии Lactoba-cillus rhamnosus обладал более высоким уровнем адгезивности, чем фекальные изоляты [73].

Спорным остается вопрос о потенциальной опасности бифидобактерий. Так наиболее широко представленный в кишечнике вид Bifidobacterium bifidum по-видимому не представляют опасности в отношении развития аутоинфекций из-за низкого уровня транслокации и патогенности. В опытах по изучению транлокации и защитного действия против инфекции, вызванной E.coli O157:H7 доказана безопасность и эффективность Bifidobacterium longum [148]. Однако другие виды бифидобактерий (В. dentium, В. adolescentis) высеваюся при эндокардитах, бактеремиях, местных инфекциях, инфекциях ротовой полости [100].

Другие представители облигатной микрофлоры так же представляют риск развития аутоинфекций. Пропионобактерии (P. acnes) могут стать возбудителями угревой сыпи у подростков; пептострептококки - возбудителями гинекологических заболеваний, заболеваний ротовой полости (кариес, гингивит, парадонтоз), абсцессов при хирургических вмешательствах (чаще в челюстно-лицевой хирургии); энтерококки - инфекций толстого кишечника (энтероколитов), инфекций мочевыводящих путей и воспалительных процессов другой локализации, антибиотико-ассоциированной диареи, особенно у детей [82].

Представители факультативной и условно-патогенной флоры, в состоянии индигенного равновесия играющие положительную роль для макроорганизма, при транслокации также могут становиться причинами инфекций [56]. Бактероиды могут вызывать гнойно-воспалительные процессы различной локализации (гинекологические, стоматологические, раневые инфекции). Стафилококки могут стать причиной воспалительных заболеваний, септических процессов, пищевых отравлений. У детей раннего возраста стафилококковые колиты протекают тяжело и часто осложняются заболеваниями мочевыводящих путей. Патогенные стрептококки могут вызвать подострые и хронические эндокардиты, ангины, заболевания мочеполовых органов, поражения кишечника, сепсис, раневые инфекции, пищевые токсикоинфек-ции. Бациллы могут спровоцировать гнойно-септические осложнения. Clostridium perfringens, продуцируя активный энтеротоксин, способны обусловить развитие пищевой токсикоинфекции, протекающей весьма тяжело. Clostridium difficile, провоцируя развитие псевдомембранного колита, могут стать причиной эндогенной инфекции любой локализации. Отмечается их роль в развитии диарейного синдрома у детей, находящихся на искусственном вскармливании, и в генезе антибиотикоассо-

Список литературы



Комментрии






Дата создания: 17.02.2011 Дата изменения: 17.02.2011 Просмотров: 21





Статистика последних работ





Интересные работы (за сутки)
Повышение эффективности проектируемый технологичес...
Просмотров: 15
Раздел: Машиностроение и машиноведение КОРРЕКТИРУЮЩЕЕ ДЕЙСТВИЕ ПРОБИОТИКОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕН...
Просмотров: 22
Раздел: Биология Социально-экономические проблемы реструктуризации ...
Просмотров: 7
Раздел: Экономика природопользования Разработка методологии адресного проектирования од...
Просмотров: 18
Раздел: Технология материалов и изделий текстильной и легк... Языковая игра в прозе Владимира Набокова
Просмотров: 62
Раздел: Русский язык Парадоксальность творческого мышления в научном по...
Просмотров: 4
Раздел: Онтология и теория познания Институт спорта в социальной идентификации российс...
Просмотров: 11
Раздел: Социальная структура, социальные институты и проце...


Новые поступления
Проблема формирования мировоззрения школьников при...
Дата добавления: 17.02.2011
Раздел: Теория и методика обучения и воспитания Лдминистратив но—прав ов ое pes улиров ание лиценз...
Дата добавления: 17.02.2011
Раздел: Административное право Преемственность и развитие физический понятий в ус...
Дата добавления: 17.02.2011
Раздел: Теория и методика обучения и воспитания Лингвистическое исследование поэтической рифмы в р...
Дата добавления: 17.02.2011
Раздел: Русский язык Дворянское общество и государственная власть никол...
Дата добавления: 17.02.2011
Раздел: Отечественная история Динамика развития профессионально-перцептивной кул...
Дата добавления: 17.02.2011
Раздел: Педагогическая психология Социально-нравственное воспитание подростков в усл...
Дата добавления: 17.02.2011
Раздел: Теория, методика и организация социально-культурно...

12.02.2011, Минск 03:44:59 В Белоруссии создана рабочая группа по подготовке ОАО "БелАЗ" (Белорусский автомобильный завод) к выходу на международные рынки капитала. Об этом сообщил журналистам председатель правления ООО "Дойче банк" Йерг Бонгартц. Он добавил, что банк входит в рабочую группу по подготовке к первичному размещению акций (IPO) БелАЗа, передает БЕЛТА.

Й.Бонгартц напомнил, что процесс подготовки к IPO занимает не менее года. "БелАЗ сейчас находится на первом этапе такой работы. Соответственно, пока еще рано говорить о каких-либо ценовых параметрах. Но я могу сказать, что рабочая группа активно занимается этим вопросом", - сказал руководитель Дойче банка.

Заместитель министра экономики Белоруссии Дмитрий Голухов в связи с этим отметил: "У нас есть перспективы, чтобы пройти этот путь на хорошем профессиональном уровне". При этом он добавил: "Выход (белорусских) предприятий на IPO должен осуществляться в рамках единой страновой стратегии. И инициатива должна идти не только сверху, но и снизу, от самих предприятий. Учитывая текущее состояние международных рынков, а также белорусского рынка, могу сказать, что это вопросы, которые будут решаться достаточно активно в ближайшие год-два. Но в каждом случае решение должно приниматься индивидуально, взвешенно". Замминистра подчеркнул, что одну из важнейших ролей в этом процессе должны сыграть банки, международные финансовые институты.

Белорусский автомобильный завод (г.Жодино) основан в сентябре 1948г., с 2010г. - ОАО "БелАЗ". Основной продукцией предприятия являются карьерные самосвалы, фронтальные колесные погрузчики и бульдозеры, тягачи-эвакуаторы, специальные транспортные средства для подземных работ, тяжеловозы для металлургического производства и другие специализированные технологические машины. БелАЗ занимает около трети мирового рынка карьерных самосвалов и входит в группу ведущих мировых концернов по производству карьерной техники.

Презентация принципа действия.

Вложение: 3853987_prezentaciqprincip_dejstviql.ppt

Принцип действия моющих и чистящих средств «PIP»

Борьба с бактериальной загрязнённостью и заболеваниями, вызываемыми микроорганизмами - известная проблема ветеринарии, как и медицины вообще. В сельском хозяйстве ветеринария – одна из сфер, влияющих на рентабельность предприятия. В данный момент существует широкий спектр препаратов, оборудования и технологий для устранения последствий и профилактики негативного влияния микроорганизмов.

В настоящее время появилось инновационное средство нового поколения решающее проблему нестандартным путём. Продукт подавляет развитие патогенной микрофлоры с помощью самих микроорганизмов! Продукт содержит живые бактерии и ферменты, то есть является пробиотиком. Пробиотики как пищевые добавки уже не новость на рынке, но средство, о котором пойдёт речь, является чистящим пробиотиком, то есть работает на поверхностях. На данный момент этот уникальный продукт, не имеющий аналогов в мире, уже отлично показал себя в России. 

Чистящие пробиотики – уникальное моющее средство, внедряемое в России компанией
ООО «Эко Продукт 21».  В продукте «PIP»  соединены моющая основа, ферменты, несколько штаммов микроорганизмов.
Состав и технология производства являются интеллектуальной собственностью и коммерческой тайной, поскольку микроорганизмы, входящие в продукт, распространены повсеместно и могут быть подобраны. Секрет заключается в правильном сочетании штаммов и технологии производства, обеспечивающей заявленные свойства. Сфера применения продукта очень широка, здесь пойдёт речь о применении в животноводстве.

При уборке пробиотиком на очищаемую поверхность высеваются непатогенные бактерии, содержащиеся в средстве. Бактерии начинают размножаться, потребляя в пищу доступную органику (т.е. грязь). На этой же органике находятся патогенны. Технология применения обеспечивает доминирование высеваемых бактерий над патогенной микрофлорой, что приводит к вытеснению патогенов из их пищевой ниши - они теряют условия, необходимые для размножения и погибают. Ключевым моментом в данном случае является то, что в естественных условиях (не в лаборатории) наиболее распространенные патогенные бактерии для выживания создают вокруг своих колоний биопленку, внутри которой поддерживается благоприятная для них экосистема. Это позволяет патогенам выжить на поверхности даже в случае изменений окружающей среды и утери параметров, необходимых для выживания и/или размножения. Бактерии, содержащиеся в данном  моющем средстве не образуют биопленки, и они выделяют энзимы, разрушающие биопленки встречающихся повсеместно патогенов. Биопленка перерабатывается в энергию для размножения. Именно таким образом обеспечивается вытеснение патогенов.
Бактерии остаются на поверхности, пока есть условия для их выживания и размножения: 6,5<ph<9, 0°C<t<60°C, наличие влаги и органики. Если влага/пища кончилась, то они уходят в форму спор, в которой могут оставаться длительное время. При изменении среды в лучшую сторону (попадание новой грязи на поверхность), бактерии снова переходят в активную форму и снова размножаются, подавляя развитие патогенов. Таким образом, эффект "дезинфекции" (удаление патогенной микрофлоры) достигается не дезинфектантом, а непатогенными бактериями. Такая "безопасная дезинфекция" осуществляется без остановки  производства и не требует мер защиты персонала, осуществляется в присутствии продуктов, животных.

Присутствие бактерий на поверхности обеспечивает постоянную переработку вновь попавшей на поверхность грязи и упрощает последующие уборки. При постоянном применении расход средств сокращается, т.к. при высевании на уже колонизированную поверхность больший процент бактерий выживает, и рабочая концентрация раствора может быть снижена. Кроме того, отпадает необходимость во вредных дезинфектантах, а количество применяемых антибиотиков может быть сильно снижено. При этом продукт не является ветеринарным препаратом, это чистящее средство с пробиотическим эффектом.

 В линейке средств есть продукты для общих и специфических задач свиноводства, птицеводства крупного рогатого скота и других отраслей.
После серии локальных  испытаний в различных условиях компанией «Эко Продукт 21» был накоплен опыт и разработаны рекомендации по внедрению, а также нормы расхода, позволяющие наиболее эффективно использовать свойства продукта.  
Эффективность средств  подтверждается работой и европейских хозяйств. Среди прочих оценкой эффективности и контролем результатов применения на животноводческих и птицеводческих предприятиях занимается европейский эксперт Д.В.Н.  Джос Ван Эке (Dr. Vet . Jos. Van Eeke) , тел. + 32 55 45 51 76, Бельгия, (говорит по-английски).  Данный продукт внедряется в Европе, США и КНР.

В России пионером по крупномасштабному опытному применению продукта стала Владимирская область благодаря своевременной реакции ветеринарной службы на современную ситуацию. Работа проводилась на свиноводческом предприятии ЗАО «Владимирское». Результаты применения говорят сами за себя, опытное применение продолжается.

Вложение: 3853972_prezentaciqprincip_dejstviql.ppt

Вопросы по теме: «Биопрепараты для клининга»

Какова концепция средств для клининга компании «Экофрэнд»?

Немного истории. Изначально, в 1998 году, появилась компания «ЭкоРус 21» - экологическая Русь 21 века. Компания занимается индустриальным или промышленным клинингом, это чистка и обслуживание инженерных коммуникаций жизнеобеспечения зданий (канализация, вентиляция, отопление и пр.; чистит производственные цеха, оборудование и промышленные ёмкости, может мыть самолеты и железнодорожные вагоны, цистерны – все, что связанно с промышленностью, производством, зданиями, транспортом. Учредители компании всегда искали возможность работать так, чтобы после нашей чистки не оставалось «выжженной земли» и не страдали работники компании от агрессивных моющих продуктов.

Именно с этой задачи – задачи безопасности моющих продуктов для людей и окружающей нас природы – началась история компании ООО «Эко Продукт 21», которая зарегистрировала товарный знак «ЭКОФРЭНД» используемый для всех, производимых компанией, безопасных чистящих продуктов.

Основой концепции продуктов торговой марки «ЭКОФРЭНД» является: безопасность для людей, экологичность по отношению к природе, биоразлагаемость, экономическая выгодность в применении, эффективность в применении.

Что представляют собой натуральные моющие средства?

Скорее не натуральные, а безопасные моющие продукты. Дело в том, что для химиков любое вещество – это химия… А химия бывает неорганической и органической, например – человек, это органическая химия. Мы производим свои чистящие продукты на основе органической химии, благодаря этому, наши моющие продукты могут вести себя по значению PH как высококонцентрированные щелочи (Ph~13,5) или кислоты (Ph~0,5-2) – при этом не являясь щелочью или кислотой. Чаще всего это соединение органических солей. Повторить это нельзя, можно только придумать что-то свое, это знает каждый химик. Все продукты биоразлагаемы (32 дня – заключение лаборатории НИИ Синтезбелка), все продукты великолепно совместимы с биосистемой человека (заключение МЦ ЛИДО) – думаю, мы первые производители моющих средств, которые проверили свою в официальном медицинском учреждении. Кстати, там было выявлении, что одни наши продукты имеют воздействие на кожу человека с лечебно-заживляющим эффектом, другие – оказывают косметический эффект. При этом, это всего лишь моющие продукты.

Что входит в группу «биоэнзиматиков» и каков механизм их действия?

В первую очередь, что такое «Биоэнзиматики» - это моющие продукты, в которых моющая компонента усилена энзимами. Энзимы (хим. термин) или ферменты (мед. Термин) – это активные белки, которые чаще всего называют «биологическими ножницами». Энзимы в природе вырабатываются, например, бактериями и служат им для расщепления органики с целью усвоения - питания. Добавление энзимов к моющим компонентам облегчают удаление грязи с поверхностей, так как энзимы режут органическое загрязнение на мелки частички.

Наша моющая основа безопасны для человеа и природы, энзимы – продукт природы, мы получили эффективный моющий продукт безопасный для человека и природы, им пользуются даже аллергики.

Какова область применения средств на основе энзимов, как в промышленной, так и в бытовой сфере?

Мы производим два вида чистящих «биоэнзиматиков» - жидкий продукт и порошкообразный продукт. Жидкий удобнее использовать при профессиональном применении, он быстрее разводится водой и более технологичен, сухой (порошкообразный) «биоэнзиматик» - это высоко концентрированное моющее средство имеющее огромный срок хранения. Биоэнзиматики чрезвычайно эффективны для удаления органических загрязнений, их используют как просто моющее средство, так и для: мытья посуды, стирки, удаления пятен, и даже для прочистки канализационных труб.

Правда ли, что продукты «Экофрэнд» для стирки способствуют заживлению ранок на руках и как это происходит?

Да, это так. Именно Биоэнзиматики, в линейке наших моющих средств, оказывают заживляющее воздействие на кожу человека по заключению медицинского центра ЛИДО. Это может происходить не только при стирке, а и при мытье посуди или при обычной уборке.

Насколько продукты Вашей компании экологически безопасны?

Вся продукция компании экологически безопасна. Во первых, продукция создана по европейским стандартам безопасности и по европейским технологиям. Внешне это выглядит так: на водной основе, разбавляемая и смываемая водой, без цвета и запаха (цвет и запах – не моют). Продукт имеет Российский сертификат безопасности (СЭС) – 4 класс безопасности (более безопасного класса сейчас нет), продукция проверена на биоразлагаемость – полная биоразлагаемость за 32 дня, продукция проверена на совместимость с биосистемой человека – не оказывает отрицательных воздействий, а в некоторых случаях – оказывает благоприятное воздействие. Нашей продукцией торгуют магазины для аллергиков а их сертификатами и прочими документами не убедишь, их проверка – это покупатель-аллергик.

При каких температурах и рН продукты на основе энзимов «работают»?

Энзимы, это активный белок, он менее требователен к Ph фактору, чем живая бактерия. Поэтому Ph может быть завышен от нейтрального в щелочную область. Оптимальная температура для работы энзимов 40-45ºС, при этой температуре моющее средство также лучше моет ми его требуется меньше.

Насколько экономично использование продуктов на основе энзимов?

Если Вы моете кухню или ванную комнату, то использование энзимных чистящих продуктов более эффективно по сравнению с обычным моющим средством в полтора-два раза. Это выражается во времени уборки и видимом качестве. Более того, моющие продукты на основе энзимов устраняют запахи. Так как энзиматики производятся только в концентрированном виде, то водные концентрации готового моющего раствора составляют в не более 3%, а обычно 0,5 – 0,1%. Так 1 кг сверх- концентрированного биоэнзиматического порошка для регулярной стирки белья стирки требуется 5 грамм на бытовую стиральную машину, при сильном загрязнении до 20 грамм. Получается, что 1 кг порошка хватит на 200 – 50 стирок, в среднем получается 125 стирок одним килограммом!!!!

Какие новинки в области биопрепаратов появились?

Мы предлагаем потребителям сверх новейший чистящий продукт содержащий живые полезные бактерии – чистящий Пробиотик. Это комплексное соединение безопасной моющей основы, энзимов и пяти полезных для человека бактерий. Продукт имеет длительное пролонгированное действие за счет живых бактерий. Продукт моет за счет моющей основы и энзимов, устраняет запахи, глубоко очищает органическую грязь за счет бактерий. Более того, на поверхности исчезают инфекционные вредные человеку бактерии. Продукт экономически чрезвычайно выгоден, предназначен для регулярной уборки, его расход понижается с течением времени от 3% до 0,3-0,1%, в отдельных конкретных случаях бывает достаточно концентрации рабочего раствора в 0,03%. Регулярная уборка делается значительно легче, экономится время на уборку. Можно сказать, что это продукт для элитной уборки помещений.

Что представляет собой российский рынок биопрепаратов для клининга?

Российский рынок биопрепаратов бурно растет. Появилось много новых продуктов, в том числе Российского производства. Мы пока лидируем в этом направлении, так как сумели создать продукт объединяющий моющую компоненту и живую клетку, более того гарантируем срок хранения продукта не менее 1 года при комнатной температуре. Продукты востребованы пока не всеми, но самосознание людей постепенно изменяется – начинают понимать, что безопасность своего собственного жилья, помещений для работы, продуктов питания – это очень важная часть нашей жизни. Пора прекратить размазывать грязь и травить свое собственное жилище ядами дезинфектантов! Мы за Чистящие Пробиотики!!!

ЗАПАХ

Запах, дух; душок, вонь, зловоние, смрад; благовоние, благоухание, аромат, букет; амбре, пахучесть, душистость.
Словарь русских синонимов и сходных по смыслу выражений. Автор Н. Абрамов

О запахах

Методы удаления запаха:

* Улавливание молекул (задержание фильтрами, осаждение на фильтрующих элементах элекростатикой, поглощение и химическое связывание – адсорбенты)
* Маскировка запаха (молекулы запаха либо окутываются молекулами другого вещества, либо «забивают» своей активностью и концентрацией основной запах)
* Устранение природы запаха (расщепление молекул запаха

Некоторые рекомендуемые (обязательные) моменты борьбы с запахами. (Устранение источника запаха)

Что же такое запах? Запах это молекулы вещества находящиеся в воздухе, которые попадая через нос на чувствительную слизистую оболочку (природный газоанализатор) вызывают определенную реакцию. Рецепторы чувствительной слизистой оболочки посылают в мозг сигналы, которые распознаются как различные запахи.

Запах может быть и наслаждением и проблемой. Нет смысла отказываться от наслаждений, а как быть когда запах характеризуется как душок или смрад? Вывод очевиден, со зловонием надо бороться.

За долгие годы борьбы с запахами люди выработали несколько способов удаления запахов. Первый – это отделение молекул запаха от воздуха. Здесь существует несколько методик. Самый простой – фильтрование воздуха фильтрами с принудительной прогонкой электровентилятором. Фильтры по своей сути бываю разные, действующие на принципах законов физики – электростатика, ионизация, и действующие на химических принципах – задержание определенного типа молекул в фильтрах химическим связыванием. Самый известный пример – фильтр противогаза. Все фильтры требуют затрат энергии на принудительную прогонку очищаемого воздуха через фильтрующий элемент.

Вторым, способом борьбы с запахами являются различные способы их поглощения. Метод поглощения, в общем случае, не требует дополнительных условий. Поглощающее вещество – адсорбент располагают в помещении, где желательно избавиться от запаха. Адсорбент работает без внешнего вмешательства со стороны человека, но имеет ограниченный срок действия. Народная мудрость имеет в своем арсенале огромное число таких примеров. Кто-то кладет черный хлеб в холодильник и рекомендует положить порезанную луковицу – как стерилизатор, кто-то развешивает мокрые полотенца в курительной комнате, промышленность выпускает различные адсорбенты упакованные в коробочки-сетки.

Третий способ – «освежение» воздуха, или дезодорирование. Мы все знакомы с дезодорантами для туалетных комнат. В большинстве случаев – это аэрозоль. Дезодорант надо распылить в помещении – часть молекул запаха будет поглощено (адсорбированно) мелкими капельками жидкости, вследствии чего понизится концентрация молекул запаха в воздухе. Все дезодоранты содержат в себе какие либо парфюмерные отдушки, которые испаряясь из распыленного дезодоранта заполнят объем помещения приятным запахом. Как правило, при дезодорировании помещения не происходит полного устранения неприятных запахов – запахи «маскируются» более сильным запахом дезодоранта. Во многих случаях дезодорирования помещения бывает достаточно и многих этот метод устраивает, однако – запах все равно в помещении присутствует. Одной из разновидностей дезодорирования воздуха является не распыление, а простое расположение в помещении сильно пахучего вещества. Многим знакомы автомобильные дезодоранты. Этот метод действует благодаря увеличению концентрации «другого запаха», запаха дезодоранта, в «освежаемом» объеме. Чтобы дезодорант распространял свой запах по помещению быстрее, его надо расположить либо в потоке приточного воздуха, либо увеличить площадь испарения дезодоранта. Кто-то это любит, а кому-то это не нравится, говорят, что от высокой концентрации запаха болит голова…, тут на «вкус и цвет …».

И последним методом устранения запаха являются средства уничтожающие природу запаха. Что значит уничтожить природу запаха? Это значит, что надо уничтожить молекулы запаха, и при этом не создать новых запахов. В общем случае, достаточно бывает разделить молекулу запаха на составляющие.

Такое действие могут выполнять БИО препараты, содержащие энзимы (они же называются в медицине – ферменты). БИО препараты распыляются в воздух в необходимом количестве, при этом запах исчезает полностью, так как молекулы запаха прекращают свое существование в том виде, в котором они вызывают идентификацию слизистой носа – как запах.

Немаловажное дополнение!!!! Как Вы догадываетесь, запах не может существовать сам по себе. Если есть запах, значит должен быть источник запаха. Залогом успеха при борьбе с запахом является удаление источника запаха. Например, если есть устойчивый запах тухлой рыбы в холодильнике, то бесполезно брызгать в холодильник устранитель запаха, или помещать туда вещество поглощающее запах (адсорбент). Надо убрать испортившуюся рыбу, помыть холодильник – и лучше это сделать энзимными БИО препаратами, а затем можно бороться с остатками запаха пометив в холодильник адсорбент или обработав внутреннюю повехность и воздух БИО устранителем запаха.

И у Вас всё получится!!! ?

Все чистящие и моющие средства, которые предлагает ООО «ЭкоПродукт» устраняют причину запаха.

Для дома или офиса, а также в местах массового скопления людей мы рекомендуем тм «PIP»

PIP-универсальный очиститель идеально подходит для всех видов поверхностей и устраняет причину возникновения запаха.

PIP-санитарный очиститель предназначен для гигиенических комнат (санитарные комнаты и ванные комнаты)

PIP- AHC идеально применим в местах присутствия животных. PIP- AHS для стабилизации мест содержания животных. (Полностью устаняет причину возникновения запахов)

PIP-spray ВОЗДУХ – для оздоровления в помещениях среды обитания. (устраняет причину возникновения запахов )

С уважением компания ООО «ЭкоПродукт21»

Новинки и мифы

Скажу банальность – в нашей стране существует рынок моющих средств. У этого рынка много аспектов – политический, экономический, хозяйственно-прикладной, у рынка есть наполнение, предложение и много тонкостей. Сейчас предлагается много «новых» продуктов. Давайте попытаемся понять, что на рынке моющих средств действительно новое, а что – не очень, и что соответственно является мифом. Для этого желательно окунуться в окружающий нас мир и посмотреть его реакцию на предлагаемые моющие средства. Реклама сыпет на наши головы кучи лозунгов и старается «зомбировать» потребителя, что именно «это моющее средство» это то, что вам надо. Это битва гигантов и рекламных бюджетов. Озадачившись просмотром прессы, мы можем увидеть огромное число статей на тему моющей химии, диапазон статей от – «нас травят» до «у нас все прекрасно». Многие знают, что у нас строятся новые производства, выпускающие бытовую химию, это строительство ведут, как правило, гиганты западной индустрии, они занимают самую лакомую нишу рынка моющих средств – нишу широкого бытового потребления. Новые производства в нашей стране с западными технологиями – это же здорово! Но, пытливый ум сможет соединить воедино информацию о новом производстве и статьи в прессе, вычленить заказные рекламные статьи и оставить «сухой осадок». Получается картинка, как говорится, не очень. Оказывается, многие производства, надо отдать должное – не все, это демонтированные европейские производства, не соответствующие требованиям экологии, старые отлаженные технологии дают низкую себестоимость продукта. Для нас они новые, а на западе они «старые», но не выработавшие свой экономический потенциал. Разобрать там и собрать здесь – дешевле, чем создать новое современное производство. Моем тем, что предлагают. И пусть мэр мечет гром и молнии заявляя на совещаниях, что очистные сооружения города находятся в плачевном состоянии, и не потому что они рухнули – целы, а потому что сливающиеся в них остатки моющих средств убивают всю «биологию», органическая грязь не разлагается забивая фильтры и отстойники. Про вредность для здоровья и упоминать не хочется. Про производителей новинок с этикетками и названиями «сходными до состояния смешения» с продуктами известных рекламируемых производителей говорить не будем.

Что же интересного остается? Это экологически безопасные продукты!

На рынке моющих средств есть малая доля моющих средств сделанных по современным технология и являющихся новинками, к новым свойствам моющих средств относится их экологическая безопасность и дружелюбность к организму человека и к окружающей среде.

Биоразлагаемость – один из современных козырей на рынке моющих средств. Практически все, или почти все, производители предлагают биоразлагаемые моющие средства. Это хорошо и правильно, часто это новинки. Биоразлагаемостью своих средств козыряют даже поставщики сырья – «этот ПАВ биразлагаем, срок разлагаемости 90 дней…», многовато конечно, но удовлетворяет экологическим требованиям. В этой теме к мифам можно отнести только тех производителей, кто не утруждает себя исследованиями и не подтверждает свои утверждения «на этикетках» свидетельствами авторитетных сертифицированных, а лучше – независимых, исследовательских лабораторий. В таких случаях сразу вспоминается фраза из анекдота «…а кто, кто это видел? – Кто? Кто? Да ваш Билл с деревянными глазами…»

Смываемость водой – тоже сильно, и совсем не дурно. Подтверждения заявляемого тоже хотелось бы видеть у всех, кто декларирует это свойство своих моющих средств.

Без цвета и запаха – эти свойства натуральности продукта чаще всего становятся жертвой «зомбированного» потребителя, привыкшего чтобы было красиво и пахло душисто. Это не беда, что моющие жидкости цветные и ароматные, есть красители и парфюмерные отдушки которые не вредны и биоразлагаемые. Не стоит забывать, что цвет и запах – не моет.

К современным веяньям следует отнести концентрированные моющие средства универсального назначение. Продаются они под следующим лозунгом – купил один раз и все что есть в доме, да и на улице, моешь целый год. И такие средства представлены на рынке России. В чистом виде новинками их не назовешь, зато сейчас их достаточно солидно и устойчиво предлагают для потребителя. Средства не дешевы – разработки достаточно свежие, современные, отвечающие всем современным экологическим нормам. Новые не дешевые моющие средства плохо берут магазины для продажи – потребитель к ним не привык, поэтому скупает не быстро. В чем же секрет новых современных разработок концентрированном моющих средств? Эти моющие средства изготовлены на принципиально новой моющей основе и идеологии мытья. Во главу угла ставится безопасность, а основным и ключевым элементом современного моющего средства является ПАВ. На западе все чаще начинают говорить о ПАВ с синергетическим эффектом. В общем случае слово «синергетика» можно трактовать как стремление неких беспорядочных структур к естественному самоупорядочиванию, т.е. из хаоса к порядку. Применительно к моющим средствам под словом синергетика понимают комплекс веществ обладающих суперэффектом. Представьте, что у вас есть ПАВ 1 и ПАВ 2, каждый в отдельности обладает хорошими моющими свойствами, пусть моющее свойство ПАВ равно единице. Синтезировав комбинацию этих двух ПАВ по логике мы должны получить моющие свойства комбинации равные двойке (1+1=2), однако синергетический ПАВ дает очень любопытный эффект 1+1=3 по моющим свойствам. Т.е. комбинация двух ПАВ усиливает свои свойства. Производство и использование в моющих средствах синергетических, экологически безопасных ПАВ и является сейчас новинкой на рынке моющих средств.

Моющий состав на основе синергетических ПАВ биоразлагаемый, он многократно разбавляется водой, при этом, не уменьшая а увеличивая свою моющую способность, полностью смывается водой, не вступают в химические реакции с очищаемыми поверхностями и грязью, как правило, не имеют цвета и запаха. Представьте себе, что вам показывают загрязненную поверхность, которая кажется чистой, например дверцу холодильника. Затем берут моющее средство и капают им на дверцу – капелька пробегая по поверхности оставляет чистую дорожку. Затем разбавляют моющее средство водой пополам – опять капают и опять чистая дорожка, и так несколько, много раз – результат повторяется, чистая дорожка и потемневшая от грязи капелька. Здравый смысл вам подсказывает – там осталась одна вода. Но нет, капелька чистой воды пробегая по поверхности не оставляет чистой дорожки и не меняет своего цвета – значит все-таки что-то моющее там осталось.

Что же это за вещества, которые наверняка и все равно заменят привычные моющие средства? Вот тут нас и поджидает разочарование и недоумение. Никто не хочет раскрывать формулу, а технологию получения – тем более. Вместе с моющими средствами, современными ПАВ и прочим прогрессом к нам пришли ноу-хау и коммерческая тайна. Те, кто знаком с требованиями российской сертификации знают, что надо подать формулу, а порой и технологию. С этими продуктами значительно больше сложностей, сертифицирующему органу производитель иди дистрибьютор готов предоставить сам продукт, готов оплатить исследования, а вот формулу и технологию раскрыть не готов. Плохо это или хорошо? Я думаю – нормально. Если исследования проходят честно, то зачем знать формулу или технологию производства вещества, надо просто его исследовать и дать заключение. Если заключение экспертов свидетельствует – моет, безопасный, биоразлагаемый; значит все в порядке – можно использовать. Не надо быть провидцем, чтобы предсказать, что за такими веществами будущее. И пусть сейчас на них не сорвать большой экономической выгоды, зато можно сохранить себя и окружающий нас мир.